正文 第5章 風濕病診斷的檢查項目(1)(1 / 2)

實驗室檢查抗核抗體

風濕性疾病一大特征是患者血液中自身抗體的出現,這種抗體以抗核抗體為主。抗核抗體有狹義和廣義之分,狹義的抗核抗體是指細胞核內的DNA、RNA、蛋白或這些物質的分子複合物的一組自身抗體的總稱;廣義的抗核抗體則是細胞內所有抗原成分(即能使人體產生免疫反應的物質成分)的自身抗體的總稱,這些抗原包括細胞核、細胞漿、細胞骨架、細胞分裂周期等成分。抗核抗體主要存在於血清中,也可存在於胸水、關節滑膜液和尿液中。

臨床指標對於風濕病的治療固然有著重要的作用,而實驗室檢查在確立診斷、檢測病情、評估預後、探討發病機製方麵也都起著巨大作用,因此要最終確立診斷,還應當借助實驗室檢查。風濕病的實驗室檢查項目非常多,下麵我們介紹一些簡單易懂的項目。

測定本抗體的方法有間接免疫熒光法、放射免疫法、酶聯免疫吸附試驗法、血凝法等。我國臨床檢查目前多采用前兩種方法,尤其是間接免疫熒光法。

此法是以短膜蟲或馬錐蟲為底物,利用其體內含有的純雙鏈DNA,進行免疫熒光測定。測定時將患者的血清加到底物標本中,在濕盒中37℃保溫30秒,洗滌後加上熒光標記的抗球蛋白抗體。由於風濕病患者的血清中存在抗細胞核成分的抗體,因此會在熒光顯微鏡下觀察到特異的亮綠色熒光,即結果呈陽性,證實患有風濕疾病。

抗核抗體在多種自身免疫病中呈不同程度的陽性率,如係統性紅斑狼瘡陽性率為95%~100%,類風濕關節炎為10%~20%,混合性結締組織病為80%~100%,幹燥綜合征則為10%~40%,全身性硬皮病是85%~90%,而狼瘡性肝炎是95%~100%,原發性膽汁性肝硬化是95%~100%等。在類風濕病患中,小兒類風濕陽性率約為19%~35%,而伴發虹膜睫狀體炎者陽性率高達50%~90%,因此抗核抗體陽性預示類風濕有發生慢性睫狀體炎的可能。

抗角蛋白抗體主要見於類風濕關節炎,並可在類風濕疾病發病以前若幹年出現。所謂抗角蛋白抗體,就是一種人的自身抗體,是類風濕病患者血清中的一種能與鼠食管角質層反應的抗體,對類風濕病具有特異性。

目前醫學上常用的檢測抗角蛋白抗體的方法有免疫印跡法和間接免疫熒光法兩種,又以間接免疫熒光法應用較為廣泛,其檢測方法如下。

取6周大的雄性韋斯大鼠食管中下1/3段作為抗原,做成4~5微米厚的冰凍切片,於-70℃中保存備用。檢測時將1∶20稀釋後的血清加到冰凍切片上,在濕盒內37℃孵育30分鍾,而後漂洗、吹幹,再加熒光素,甘油封片,最後在熒光顯微鏡下觀察,以角質層出現典型的規則線狀或板層狀熒光為陽性。

若抗角蛋白抗體處於正常值時,其所檢測的結果呈陰性,如呈陽性,也不一定就能說明患有風濕疾病,因為正常健康成人體內也含有約2%的抗角蛋白抗體。不過研究同樣表明,抗角蛋白抗體呈陽性的“健康人”,最後幾乎都發展成了典型的類風濕病患者。抗角蛋白抗體罕見於其他非類風濕關節炎以及非炎症性風濕病,如果您的抗角蛋白抗體檢測結果呈陽性,且自身抗體陽性數目越來越多,那麼您就極有可能患上了係統性紅斑狼瘡、類風濕關節炎、幹燥綜合征、係統硬化症或強直性脊柱炎等其中之一,尤其是類風濕關節炎,因為在類風濕關節炎患者中,抗角蛋白抗體陽性率達36%~59%,特異性達95%~99%。所以說,抗角蛋白抗體的檢測為類風濕病患者提供了早期診斷指標。

抗環瓜氨酸肽抗體,是人體一種自身抗體,作為一種新的高特異性和高陽性預報率的抗體,抗環瓜氨酸肽抗體對類風濕疾病的診斷具有良好的敏感性和特異性。

目前臨床上對抗環瓜氨酸肽抗體的檢測普遍使用試劑盒法。如德國產抗環瓜氨酸肽抗體RA/CP酶聯免疫吸附測定法檢測試劑盒,試劑盒規格為96人份/盒,適用於疑是類風濕關節炎患者的血清標本,也可進行大批量標本篩查,而後自動化檢測,得到客觀結果,數據存檔。具體操作程序:將試劑凝固後分離血清置於-20℃低溫保存待測。按照試劑盒說明書操作。

當抗環瓜氨酸肽抗體大於50AU/mL,即可對早期類風濕關節炎有較高的敏感性和特異性,且患者血清中抗環瓜氨酸肽抗體的平均水平為1100AU/mL抗環瓜氨酸肽抗體(範圍為57~3419AU/mL),而正常人的抗環瓜氨酸肽抗體的平均水平僅為6.8AU/mL(範圍為1~39AU/mL)。因此,抗環狀聚絲蛋白的多肽片段可以成為輔助早期診斷類風濕關節炎的一個指標。