三、閉合性骨折模型
（一）複製機製
通過暴力方法造成動物長骨骨折。
（二）複製方法
常選用成年健康兔、大鼠、小鼠等實驗動物，在麻醉下通過支架，在一定的杠杆力的作用下將實驗動物的脛腓骨折斷，再用小夾板包紮固定。
暴力型骨折模型較好地模仿了骨骼遭受暴力後發生骨折的過程。此法所獲得的閉合型骨折模型更適合於骨折自然愈合過程的觀察。
（三）研究方法實例
例4費琴明等為探討大鼠標準脛骨骨折模型的製作，首先將雌性SD大鼠的雙側脛骨髓腔插入9mm直徑的醫用克氏針，然後通過自行設計製作的骨折造模支架造成脛骨中段閉合骨折，術後通過X線片、組織學檢查了解骨折類型、移位程度以及骨折的愈合情況。對本骨折模型的骨折愈合過程的觀察，可見骨折愈合呈現從纖維骨痂到軟骨骨痂，最後向小梁骨骨痂逐步過渡的典型的骨折二期愈合過程。
1.造模方法
SD大鼠62隻，雌性，平均體重368±40g。質量濃度為0.35%的戊巴比妥鈉溶液行腹腔麻醉，無菌條件下從脛骨平台前緣插入一根預製的消毒醫用克氏針，然後把大鼠後肢小腿人工固定於造模支架的鐵砧上，暴力撞擊點位於脛骨中段前方最高點處，助手提起重錘至30cm高處，讓其沿中軸自由落體通過撞擊托盤，力傳導至刀片上，撞擊脛骨中段造成骨折。
2.觀察方法
（1）X線片：造模當天，在麻醉下攝大鼠雙後肢X線片，了解骨折類型及移位程度。然後把造模合格的大鼠分成3組，在骨折後第2、3、4周時分別給予斷頸處死，取脛骨全長標本，拔去克氏針後在同一條件下分別攝X線片，觀察骨折的愈合情況。
（2）組織學：在骨折後第2、3、4周的標本中，每組隨機選取10個不同大鼠的脛骨，分別截取1cm骨折段標本，10%中性甲醛固定24小時，14.3%EDTA脫鈣，梯度酒精脫水，二甲苯透明，浸蠟，包埋，連續縱形切片，厚5μm，HE染色。光鏡下觀察骨折愈合的情況。
（3）研究結果：骨折後第2、3、4周的脛骨標本作X線片觀察，可見外骨痂逐漸增多，至第4周時骨折線仍然可見；但未見骨折進一步移位、骨折延遲愈合以及骨不連等現象。組織學觀察骨折後第2周骨折兩端的骨膜下已出現膜內化骨，骨折端纖維性骨痂和軟骨性骨痂並存，軟骨細胞已開始肥大、變性；第3周骨折端軟骨性骨痂進一步增多，纖維性骨痂少見，骨痂表麵有部分小梁骨骨痂出現；第4周軟骨性骨痂減少，小梁骨骨痂增多，纖維性骨痂幾乎不存在，皮質骨出現吸收腔隙，開始骨痂的改建塑形。
第三節 慢性化膿性骨髓炎實驗模型
慢性化膿性骨髓炎是指急性骨髓炎急性感染消退後，留有死骨、死腔和竇道。病程可長達數月、數年，甚至數十年。實驗模型骨髓炎感染源最常見的為金黃色葡萄球菌，其感染途徑分為血源性感染、創傷性感染，其中創傷性感染最常見。
一、創傷性感染法
（一）複製機製
細菌從傷口侵入骨組織為創傷性感染，如開放性骨折感染後發生的骨髓炎。通過在骨骼有創傷的部位注入金黃色葡萄球菌混懸液，使之形成骨髓炎模型。
（二）複製方法
取SD大鼠，氯胺酮行腹腔腹膜下注射麻醉，右後肢膝前區剪毛、消毒，屈曲膝關節，用8號針頭由脛骨平台前中1/3交界處平行脛骨幹縱軸略偏後朝脛骨骨髓腔方向鑽孔刺入，有突破感，放出少量骨髓；另取8號針頭經前孔刺入脛骨髓腔內，注入耐甲氧西林金黃色葡萄球菌混懸液（按0.01ml/20g體重計算注入量）與5%魚肝油酸鈉0.03ml的混合液。退出針頭，對針孔稍加壓迫，造模後觀察局部反應情況。4周後，局部可見紅腫、竇道形成、流膿，X線片可見骨膜增生，皮質增厚，密度增加或為包殼，其內有死骨及死腔形成。
（三）研究方法實例
例1沈霖介紹一種慢性化膿性骨髓炎的造模方法，該模型可表現膿腫、竇道、骨膜反應、溶骨破壞及死骨等征象。
1.造模方法
家兔右小腿內上側剪毛，在無麻醉下切開皮膚及皮下組織，切口約1cm，暴露脛骨幹骺端。用16號針頭鑽孔至骨髓腔，放出少量骨髓。然後用小棉球浸沾3×109/ml金葡菌懸液0.3ml，填入骨髓腔內，再從鑽洞孔注入5%魚肝油酸鈉0.5ml，全層縫合切口。1周後，沿原切口手術取出棉球，全層縫合。
為了選出複製骨髓炎模型適合的細菌懸液濃度，作者分別用細菌數為1×106/ml、3×106/ml、1×109/ml、3×109/ml及6×109/ml懸液進行造模，結果低濃度懸液造模失敗，高濃度致動物死亡率達64.3%，3×109/ml懸液造模除個別動物死亡外，其餘均獲成功。此實驗作者還認為細菌毒力強弱亦是本造模法成敗的關鍵，而細菌庫菌種大都在培養液中反複傳代，毒力大減。因此，實驗前把菌種先注入活體動物內，繁殖1～2代，以恢複或增加其毒力。
2.觀察方法
（1）造模部位的形態學檢查：在肉眼、X線片觀察造模部位的形態變化基礎上，分別於造模後1、2、4周各處死10隻動物，局部取材，常規脫鈣、切片，HE染色，在光鏡下觀察其病理學變化。
（2）造模前後動物體溫、體重及白細胞數量的變化。
（3）造模前後紅細胞免疫功能及血清溶菌酶含量變化。
3.研究結果
（1）造模後1小時，造模部位輕度腫脹，X線片見右脛骨上端有直徑1mm左右圓形缺損區。1周後，局部明顯紅腫，X線片見腫脹的軟組織陰影，少量骨膜反應，原鑽孔邊緣骨密度增高，周圍局限性骨質疏鬆。光鏡下見骨髓腔內大量炎性細胞浸潤，呈彌漫性疏鬆結締組織炎改變。第2周感染局部腫脹明顯，捫之有波動感，切開後見黃色黏稠膿液。X線片除腫脹、骨膜反應等改變外，病變骨質呈彌漫性疏鬆脫鈣。光鏡下見病灶中心骨小梁溶解，骨髓壞死，小膿腫形成。第4周局部形成竇道，竇道口有肉芽組織增生，高出皮膚表麵，表皮向內長入竇道口邊緣，膿液呈腐肉惡臭。X線片見骨質破壞區較前增大，形成死腔，並有死骨殘留。光鏡下見病灶區骨質壞死，骨細胞消失，骨髓腔內急性炎性細胞減少，但肉芽組織增生，其間可見中性細胞及漿細胞。
（2）造模前後動物體溫、體重及白細胞數量的變化。
例2劉獻祥等為了觀察骨髓方治療大鼠慢性骨髓炎的療效，采用沈霖法建立大鼠慢性骨髓炎模型。
1.造模方法
參照沈霖法造模。
2.觀察方法
造模後，動物隨機分成四組：骨髓方Ⅰ組、骨髓方Ⅱ組、對照組和空白組。治療1個月，觀察WBC、RBC、E-C3bRR、E-ICR、血清溶菌酶含量、骨X線片、病理組織學指標。
3.研究結果
造模4周後，局部紅腫、竇道形成、流膿，X線片顯示骨膜增生，皮質增厚，密度增加或為包殼，其內有死骨及死腔形成。免疫指標。
例3黎莉等為研究蛇葡萄根膏對實驗性慢性骨髓炎的療效，成功地建立了一種封閉的大鼠慢性骨髓炎模型。該模型基本上對皮膚、肌肉和骨無損傷，適合外用給藥的實驗需要。在造模基礎上。用蛇葡萄根膏外敷進行治療，治療結果以骨髓腔細菌數為主要指標進行評價。結果表明，蛇葡萄根膏能明顯抑製骨髓內金葡菌，能減輕骨髓炎的炎症程度。