正文 第十章 骨傷科免疫學檢測基本實驗技術(十七)(3 / 3)

在脊髓損傷的修複方麵,中醫中藥也做過一些探討和嚐試。中醫認為脊髓損傷係損傷督脈,在功能上,督脈與脊髓作為中樞神經的功能相似。三七性溫能通,味苦疏泄,具有化瘀止血,消腫鎮痛等功效,三七總皂甙(PNS)是三七的主要藥理活性成分。李誌強等以65隻Wistar大鼠為研究對象,探討脊髓繼發性損傷的病理生理機製及三七總皂甙防治該病的作用機製,采用改良Allen打擊法,咬除T13椎板,造成大鼠脊髓損傷模型,藥物幹預。取傷段及鄰近傷段的脊髓組織,冷凍切片,進行抗熱休克蛋白70(HSP70)免疫細胞化學ABC反應,DAB顯色,觀察各組脊髓組織HSP70陽性神經元的表達變化。結果顯示:脊髓HSP70陽性神經元表達以PNS組最強,從而推測HSP70參與了脊髓繼發損傷的病理生理機製,PNS可能通過誘導脊髓組織HSP70神經元的表達而起保護作用。

韓鳳嶽等運用免疫細胞化學法(ABC法)和定量圖像分析檢測,在脊髓半橫斷損傷後,服用中藥髓複康對於背根節(DRG)內神經元降鈣素基因相關肽(CGRP)表達的影響,並檢驗損傷脊髓組織的修複再生,是否與DRG內CGRP的表達有關聯。結果顯示:①脊髓半橫斷引起同側首、尾側各3個DRG內,CGRP表達的明顯和持續性下調;②損傷後組服髓複康衝劑,可以明顯減輕,但不能完全阻止脊髓損傷誘發的CGRP表達下調;③損傷後給服中藥補陽還五湯(或用大劑量的氫化可的鬆)治療,不能減輕脊髓損傷誘發的CGRP表達下調;④脊髓損傷後服用髓康複的大鼠,其脊髓損傷區有明顯的修複再生。該結果不僅表明CGRP表達的變化與脊髓組織的損傷和再生有一定的關聯;而且也表明,髓複康通過對CGRP-mRNA表達的調製,影響神經元DNA的合成,可能是它促進脊髓損傷組織的修複再生的機製之一。

(四)軟組織研究方麵

有學者在軟組織損傷病理機製和軟組織肉瘤與抑癌基因p53的關係方麵,運用免疫組織化學方法進行深入研究。黃曉春等為探討組織纖維連接蛋白在軟組織創傷修複過程中的變化和意義,采用大鼠腓腸肌鈍擊傷模型,分別於傷後8小時,24小時,72小時,7天和12天進行一般觀察、組織切片、纖維連接蛋白免疫組化(PAP法)觀察。結果顯示:創傷後組織纖維連接蛋白迅速增加,於傷後72小時達高峰,第7天開始消退,纖維連接蛋白陽性區主要分布於變性、壞死區域和小血管周圍。72小時後成纖維細胞明顯增多,細胞纖維連接蛋白陽性,但陽性程度不如前者。提示:軟組織創傷修複過程中組織纖維連接蛋白主要來源於血漿纖維連接蛋白的沉積,而後期則有一部分來自成纖維細胞的合成。

抑癌基因p53突變在多種癌組織發生發展過程中起著重要作用,但對各種軟組織肉瘤中p53基因研究較少,為此楊慶媛等對78例軟組織肉瘤標本進行p53蛋白單克隆抗體免疫組化染色(ABC法),以探討突變型p53蛋白在軟組織肉瘤中的表達及其意義。結果顯示:總陽性率為43.58%,其中在脂肪肉瘤(47.05%)、橫紋肌肉瘤(46.66%)、纖維肉瘤(45.45%)中陽性率較高,而平滑肌肉瘤中(7.14%)陽性率較低。同時發現p53蛋白的陽性表達與肉瘤的分化程度有關,分化愈低其陽性率愈高,且在不同類型肉瘤中有一定差別。提示:p53抑癌基因突變在軟組織肉瘤的發生發展過程中起著重要作用。

(林燕萍李異龍)