1)10%甲醛溶液:甲醛溶液(36%~38%)10ml,水(自來水或蒸餾水)90ml。
2)中性甲醛溶液:將甲醛溶液(36%~38%)10ml,蒸餾水90ml放入500ml玻璃瓶中,加入適量的碳酸鎂(Magensium carbonate)中和後為pH7.6,或用碳酸鈣(Calcium carbonate)中和後為pH6.3~6.5。振蕩後放置24小時,取其上清液配製。
3)磷酸緩衝甲醛溶液:甲醛溶液(36%~38%)10ml,蒸餾水90ml,磷酸二氫鈉(Sodium dihydrogen phosphate)4g,磷酸氫二鈉(Sodium hydrogen phoshate)6.5g。這種緩衝劑配製的甲醛溶液,其優點如下:組織即使較長時間浸在此液中,也不會失其染色性質,電子顯微鏡標本的結構保存也較好。
4)甲醛溶液-鈣液:甲醛溶液(36%~38%)10ml,無水氯化鈣1g,蒸餾水90ml。此液用於固定脂類,固定24小時。
(2)Carnoy(卡諾)液:無水乙醇(Ethyl alcohol absolute)60ml,冰醋酸(Glacial acelic acid)10ml,三氯甲烷(Chloroform)30ml。此液穿透速度快,小塊組織一般固定20~40分鍾,大型材料不超過3~4小時。如放置過久,對組織不僅會產生膨脹作用,且有硬化現象。固定後用95%酒精洗滌,可保存於80%酒精中。無水乙醇可固定細胞質和肝糖,加入冰醋酸可固定染色質,又可增加穿透力。固定後的組織可直接入無水乙醇中脫水(換液2次),此液能固定細胞質和胞核、尤其適宜於染色體、中心體等細胞器,故多用於細胞學的製片。固定的組織適合各種染色。
(3)Bouin(布應)液:苦味酸(Picric acid)飽和液75ml,甲醛溶液(36%~38%)25ml,冰醋酸5ml。配製苦味酸飽和液為1%~2%水溶液即可。此液收縮少,穿透速度快,固定後不經水洗,直入70%乙醇脫色(在乙醇中加入數滴純氨水能更快地將黃色脫掉)。此液為常用固定液,用於一般組織和胚胎的固定。此液可保持細胞的細微結構,組織易染色,冰醋酸可固定染色質,苦味酸保持組織適當的硬度。
(4)Zenker(岑克)液:重鉻酸鉀2.5g,氯化汞(Mercuric chloide)5g,蒸餾水 100ml。冰醋酸臨時加入5ml。配製此液時先將重鉻酸鉀、氯化汞和蒸餾水混合後加溫溶解,冷卻過濾,置於棕色瓶中貯存,此液較穩定。
此液在使用前臨時加入冰醋酸,立即使用,不然會產生沉澱,失去作用。此固定液使胞核和胞質染色較清晰。一般固定12~24小時,固定後的組織須經自來水衝洗4小時再轉入脫水劑。
(5)Helly液(Zenker-Formol):重銘酸鉀2.5g,氯化汞(Mercuric chloide)5g,蒸餾水 100ml。甲醛溶液臨時加入5ml。此液常用於線粒體、細胞質以及胞核的固定。骨髓、脾、肝等組織最為適宜,固定細胞質也很好,也可用於固定白細胞的特殊顆粒。固定24小時,流水衝洗24小時,脫水是用碘酒精脫汞。
(6)Maximov液:Zenker貯存液100ml,甲醛(中性)10ml。此液主要是用甲醛代替Zenker液的冰醋酸,對細胞質固定很好。甲醛稍有促染細胞質的作用,能增加對酸性染料的親和力。
(7)Muller液:重鉻酸鉀2~2.5g,硫酸鈉1.0g,蒸餾水100ml。此液作用緩慢,但固定均勻,收縮也少,多用於媒染和硬化神經組織。固定時間自數天至數星期,固定過程中,須時常更換新液。固定後流水衝洗,酒精脫水。
(8)Heidenhain、Susa(蘇撒)液:甲液:氯化汞4.5g,氯化鈉(Sodium Chloride)0.5g,三氯醋酸(Trichloroacetic acid)2g,蒸餾水80ml。乙液:冰醋酸4ml,甲醛溶液(36%~38%)20ml。使用時將甲液與乙液等量混合使用。固定時間視組織塊大小而定,一般為12~24小時,固定後不經水洗,直入95%乙醇,加碘酒脫汞。本液滲透力強,收縮小。適合固定各種組織包括較硬的皮膚,適於多種染色,但不宜用於以Weigert法染彈性纖維。
(9)Gendre液:苦味酸飽和於95%酒精80ml(或85ml),40%甲醛15ml(或10ml),冰醋酸5ml。此液固定糖原最佳。小塊組織低溫固定18~24小時。
(10)Flemming液:①強液:1%鉻酸水溶液75ml,2%鋨酸水溶液20ml,冰醋酸5ml。②弱液:1%鉻酸水溶液25ml,2%鋨酸水溶液5ml,1%冰醋酸(用前加入)10ml,蒸餾水60ml。此液為細胞學固定劑,尤適用於高爾基體及線粒體的固定,它的滲透力極弱,小塊組織(2mm3)須固定24~48小時,強液適於固定髓鞘,固定的組織須用流水衝洗24小時,如組織變為黑褐色,染色前需經漂白處理,對蕃紅花紅及蘇木精著色較好。此液的缺點是固定得不均勻,不適於大塊組織的固定。固定液須臨用時配製,不能長期貯備。
(11)Dafano液:硝酸鈷1g,甲醛溶液15ml,蒸餾水100ml。此液固定高爾基體良好,流水衝洗。
(12)Champy液:3%重鉻酸鉀7份,1%鉻酸7份,2%鋨酸4份。是一種可以長期貯存的鋨酸混合液,此液pH1.5,為細胞學優良固定劑,主要用於固定線粒體及高爾基體,因穿透力較差,組織塊宜小,固定6~24小時,流水衝洗過夜。
(13)Orth液:重鉻酸鉀2.5g,硫酸鈉(可略去)1g,蒸餾水100ml,甲醛(37%~40%)(用時加入)10ml。此液為較好的常規固定劑。它的滲透力極強,組織發生收縮較少。必須臨用前配製,固定應在暗處進行,固定12~24小時或較久(4cm厚的組織塊固定36~72小時),若超過24小時,則每隔24小時須更換新液一次,此液呈黑色時失去效用,即不宜再用。固定後流水衝洗10~24小時,可貯於70%酒精中。