1.尾尖取血
(1)剪尾尖法:將動物固定或麻醉後,把鼠尾浸在45~50℃溫水中數分鍾,使血管充盈,剪去尾尖(大鼠約3~5mm,小鼠約1~2mm),從尾根部向尾尖部按摩,血即從斷端流出,取血後用棉球壓迫止血,並用6%液體火棉膠塗在傷口處。此法供小量取血之用,並可重複多次使用。
(2)切割尾靜脈法:大鼠還可用刀片切割三根尾靜脈其中的一根取血,三根靜脈可交替切割,由尾尖開始,一根靜脈可切割多次。
2.眼部取血
(1)球後靜脈叢取血:用10cm長的玻璃管,一端燒製拉成直徑1~1.5mm的毛細管,長約1cm。事先將玻璃管浸入1%肝素溶液,幹燥後使用。取血時左手捏住鼠耳之間的皮膚固定頭部,輕輕向下壓迫頸部兩側,以阻斷頭部靜脈血流。待眼球外突提示球後靜脈叢充血,右手持玻璃管,從內眥部插入,向眼底部方向插入4~5mm,到達球後靜脈叢,將玻璃管稍旋轉,血液即自行流入管內,拔出玻璃管,放鬆左手,出血即停止。大鼠一次可取血0.5~1.0ml,小鼠一次可取血0.2~0.3ml。同一動物可反複交替穿刺雙眼多次。
(2)摘眼球法:取血時左手抓緊動物頸部皮膚,使眼球外突,用眼科鑷夾去眼球,血液即可自行流出。此法多用於小鼠,取血量較多,約為小鼠體重4%~5%。但該方法易導致動物死亡,隻能取血一次。
3.心髒取血
(1)穿刺法:將動物仰臥固定於鼠固定板上,剪去胸前被毛,在左側第3~4肋間,用左手示指摸到心尖搏動,右手持注射器,選擇心肺搏動最強處垂直進針,當針頭刺入心髒時,血液借心肺搏動的力量進入注射器,即可取血。
(2)開胸法:切開動物胸腔,直視下心髒內抽血。也可剪破心髒,直接用注射器或吸管吸血。
4.大血管取血
頸靜脈、頸動脈或股靜脈、股動脈取血法。將麻醉的動物仰臥固定,分離暴露上述任何一條血管,用注射器沿血管平行方向刺入,即可抽取所需血量。也可插入導管,反複采血。
5.斷頭取血
用剪刀迅速剪去動物頭部,立即將動物頸朝下,提起動物,血液可流入已準備好的容器中。
(二)家兔和豚鼠
1.耳部取血
(1)耳緣靜脈取血:取血前先拔去取血部位的被毛,用手指輕彈兔耳或用75%酒精棉球反複擦抹取血部位,使靜脈顯著充盈,夾住靜脈的近心端,阻止靜脈回流。右手持針盡量從靜脈的近端向遠端平行刺入靜脈(逆靜脈回流方向,取血量較多),即可取血。也可用針頭在耳緣靜脈末端刺破血管或用刀片割破耳緣靜脈,讓血液自動流出即可。
(2)耳中央動脈取血:經耳中央一條較粗的動脈取血,操作方法基本與耳緣靜脈取血相同。由中央動脈末端順向心方向刺入動脈,即可取血。取血完畢後注意止血。
2.大血管取血
頸靜脈、頸動脈或股靜脈、股動脈取血法。方法同大鼠。
3.心髒取血
方法同大鼠。
4.體表靜脈取血
(1)後肢小隱靜脈取血:將動物仰臥固定,在脛部上端紮橡皮管,在脛部外側淺表皮下可見充盈的靜脈,左手兩指固定靜脈,右手持注射器沿血管平行方向刺入,即可抽取所需血量。取血完畢後注意壓迫止血。
(2)足背靜脈取血:此法適用於豚鼠,將動物右或左後肢膝關節伸直,找出足背靜脈後,左手拇指、示指拉住豚鼠的趾端,右手持注射器沿血管平行方向刺入,即可抽取所需血量。取血完畢後注意壓迫止血。
(三)犬和貓
1.體表靜脈取血多選擇前肢內側頭靜脈或後肢小隱靜脈。先剪去取血部位的被毛,用手壓迫或用膠皮帶紮緊靜脈近心端,使血管充盈,自遠心端將針頭平行刺入血管,待有回血後,解除對靜脈的壓迫,緩慢抽取所需血量。取血完畢後注意壓迫止血。
2.大血管取血
(1)頸靜脈取血:將動物仰臥固定,剪去頸部被毛,消毒,然後將頸部拉直,用左手拇指壓住頸靜脈入胸部位的皮膚,使頸靜脈充盈,右手持注射器沿血管平行方向刺入,即可抽取所需血量。取血完畢後注意壓迫止血。
(2)股動脈取血:將動物仰臥固定,伸展後肢向外拉直,暴露腹股溝,剪去腹股溝部被毛,消毒,用左手中指、示指探摸股動脈,在跳動部位固定好血管,右手持注射器,針頭由動脈跳動處直接刺入血管,當血液進入注射器時,即可抽取所需血量。取血完畢後用紗布壓迫止血3分鍾。
3.心髒取血方法同大鼠。
(四)豬
1.耳部取血耳緣靜脈取血同家兔,但豬耳皮膚較厚,應選擇銳利的針頭。
2.心髒取血方法同大鼠。
七、實驗動物的骨髓穿刺方法
大動物骨髓采集法與人的骨髓采集法很相近,都是采取活體穿刺取骨髓。小動物因體型小,骨骼小,不易穿刺,一般采用處死後由胸骨或股骨采取骨髓的辦法。
1.大鼠和小鼠
將動物處死,立即取仰臥位固定,解剖取出胸骨,從第3胸骨節處剪斷,將其斷麵的骨髓擠在有稀釋液的試管內或玻片上,混勻塗片涼幹後即可行染色檢查。
2.大動物一般取胸骨、肋骨、髂骨、股骨的骨髓,不同骨骼的骨髓穿刺點不同。動物根據穿刺部位決定固定體位,先剪去穿刺部位的被毛,消毒,局麻,用左手拇指、示指把穿刺點周圍皮膚繃緊,右手持穿刺針垂直穿刺。手法應穩而有力,小弧度地左右旋轉鑽入,當感到有落空感時,即表示針尖已進入骨髓腔,抽出針芯,多可見針芯尖上有骨髓樣物質,連接上注射器,緩慢抽吸骨髓組織,當見到注射器內有抽入的骨髓時,立即停止抽吸,以免外周血混入。將注射器內的骨髓迅速塗片數張,以備染色。如果怕抽出的骨髓少或易凝而致塗片困難,可事先準備好同種動物血清作為稀釋液。先在玻片上滴一滴稀釋液,稀釋後再塗片。拔出穿刺針後,用棉球加壓止血數分鍾。如穿刺肋骨,除壓迫止血外,還需特別注意用寬膠布封貼穿刺點,以防氣胸發生。
八、實驗動物的各種體液采集方法
(一)尿液的采集
1.用代謝籠采集尿液
代謝籠是特別設計的為采集動物各種排泄物的密封式飼養籠。有的代謝籠除可收集尿液外,還可收集糞便和動物呼出的二氧化碳。將動物放在代謝籠內飼養,通過籠底部的大、小便分離漏鬥,采集尿液。