五、實驗動物的給藥途徑和方法
在動物實驗中,為了觀察藥物對機體功能、代謝和形態的影響,常需把藥物注入動物體內。給藥途徑和方法可根據實驗目的、實驗動物種類和藥物劑量等情況而定,現將常用的方法介紹如下。
(一)經口給藥
1.口服法
把藥物放入飼料或溶於動物飲水中,讓動物自動攝取。此法優點在於簡單方便,缺點是不能保證劑量準確。
2.灌胃法
用灌胃器將藥物灌到動物胃內,灌胃器由注射器和灌胃針構成。此法劑量準確。
(1)小鼠:小鼠的灌胃針長約4~5cm,直徑約1mm。灌胃針可用注射針頭自製。磨鈍針尖,在針尖周圍點焊成金屬球,以免針頭刺入氣管或損傷消化道。針頭金屬球端彎成200°左右,以適應口腔、食管的生理彎曲度。
將動物固定好後,先用灌胃針比量測定由動物唇到最後一肋的長度,並標記在灌胃針上。給小鼠灌胃時,用左手的拇指、示指和中指抓住小鼠兩耳後頸背部皮膚,然後將鼠體反轉向上固定在左手心中,拉直後肢,以環指及小指夾住尾巴。右手持接灌胃針的注射器,先從小鼠口角插入口腔內,然後用灌胃針頭壓其頭部,使口腔與食管成一直線,再將灌胃針頭沿上齶壁輕輕進入食道,在稍有抵抗感覺(此位置相當於食管的膈部)時,即可注入藥物。若注入順利,動物安靜,呼吸無異常,表明灌胃針頭已進入胃內;若動物有嘔吐動作或強烈掙紮,則表示針頭未進入胃內,必須拔出重插,否則可能誤入氣管造成窒息死亡。灌注量:0.1~0.3ml/10g體重。
(2)大鼠:大鼠灌胃方法基本上與小鼠相同,但大鼠的灌胃針長約6~8cm,直徑約1.2mm。灌胃針可用注射針頭自製。灌注量:1~2ml/100g體重。
(3)家兔:家兔灌胃管一般可用導尿管代替並配以一個木製張口器。灌胃時需兩人合作,一人坐好,將兔夾在兩腿之間,左手緊握雙耳,固定頭部,右手抓住前肢,另一人將張口器橫放於兔口中,並將兔舌壓在張口器下,再把灌胃管從張口器中部的小孔插入,慢慢沿上齶壁輕輕進入食管約15cm。插好灌胃管後,可將其外口放於清水杯中,若有氣泡逸出,表明灌胃管誤入氣管,應拔出重插;若無氣泡逸出,表明灌胃管在胃內,方可將藥物注入,然後注入少量清水,將灌胃管內藥物衝入胃內。灌胃完畢後,應先拔出灌胃管,再取下張口器。另一種灌胃方法是將兔固定在固定盒內,左手虎口卡住並固定好兔嘴,右手取14號導尿管,由右側唇裂進入,避開門齒,將導管慢慢插入。若插管順利,插入約15cm時就已進入胃內,可將藥物注入。灌注量:80~150ml/隻。
(4)豚鼠:豚鼠灌胃方法基本上與家兔相同,但豚鼠用14號導尿管進入食管約5cm長,若無氣泡逸出,即可將藥物注入。灌注量:1.6~2.0ml/100g體重。
(5)犬:犬灌胃方法基本上與家兔相同,但犬用12號灌胃管進入食管約20cm長,若無氣泡逸出,即可將藥物注入。另一種灌胃方法是將犬嘴用紗布綁好,左手抓住犬嘴,右手中指由右嘴角插入,摸到最後一對臼齒後的天然空隙,灌胃管由此空隙進入食管約20cm,即可將藥物注入。灌注量:200~500ml/隻。
(6)貓:貓灌胃方法基本上與家兔相同,但貓用14號導尿管進入食管,若無氣泡逸出,即可將藥物注入。
(7)豬:豬灌胃方法基本上與家兔相同,但豬用12號灌胃管進入食管,若無氣泡逸出,即可將藥物注入。
(二)注射給藥
1.皮下注射
注射時用左手拇指和示指輕提皮膚,右手持注射器將針頭刺入皮下即可。
2.皮內注射
將動物注射部位剪毛、消毒,然後用左手拇指和示指按住皮膚,使之繃緊,在兩指中間注射器針頭刺入皮內,使針頭向上挑起後,即可注藥。若方法正確,可見注藥處出現一白色小皮丘。
3.肌內注射
注射部位應為肌肉豐厚和無大血管通過的部位,一般多選臀部。注射時將注射器針頭迅速刺入肌肉,回抽針栓無回血,方可進行注射。
4.腹腔注射
注射時使動物腹部向上,將注射器針頭自下腹部刺入皮膚後,再以45°角穿過腹肌,當有落空感時表示已進入腹腔,回抽針栓無回血和尿液,即可注射。
5.靜脈注射
(1)大鼠和小鼠:大、小鼠一般采用尾靜脈注射,鼠尾靜脈有3根,兩側及背側各一根,左右兩側尾靜脈較易固定,應優先選擇。操作時先將動物固定在鼠筒內,使鼠尾露出,在45~50℃溫水中浸潤5分鍾或用75%酒精棉球反複擦抹,使血管擴張,以左手拇指和示指捏住尾巴末端,右手持注射器連4號針頭,使針頭與靜脈平行(小於30°),從尾下1/4處進針,若針確已在靜脈內,則進藥無阻。若局部發白隆起,應拔出針頭,移向前方靜脈重新進針。如需反複注射,應盡可能從末端開始,以後稍向尾根部方向移動注藥。
(2)家兔:一般采用外側耳緣靜脈注射,注射前先拔去注射部位的被毛,用手指輕彈兔耳或用75%酒精棉球反複擦抹注射部位,使靜脈顯著充盈,左手示指與中指夾住靜脈的近心端,阻止靜脈回流,用拇指和環指固定耳緣靜脈遠心端,右手持針盡量從靜脈的遠端刺入,然後移動左手拇指固定針頭,放鬆示指和中指,將藥液注入。
(3)犬:多選擇前肢內側頭靜脈或後肢小隱靜脈。先剪去注射部位的被毛,用手壓迫或用膠皮帶紮緊靜脈近心端,使血管充盈,自遠心端將針頭平行刺入血管,待有回血後,解除對靜脈的壓迫,緩慢注入藥液。
(4)豚鼠:靜脈注射可選擇耳緣靜脈或外側蹠靜脈。耳緣靜脈注射方法與家兔相同。外側蹠靜脈注射方法是抓住豚鼠後膝關節,使後肢呈伸展狀態,剪去注射部位的被毛,壓迫靜脈,酒精棉球消毒後,可見粗大的外側蹠靜脈,自遠心端將針頭平行刺入血管,待有回血後,緩慢注入藥液。
(5)貓:貓的靜脈注射方法與犬相同。
(6)豬:豬的靜脈注射方法與家兔相同,且豬耳緣靜脈比家兔的更粗大,更易於注射。
六、實驗動物的取血方法
在動物實驗中,采血的方法很多,選擇什麼采血部位與使用何種采血方法,需視動物種類、檢測目的、試驗方法及所需血量而定。現將常用的方法介紹如下。
(一)大鼠和小鼠