（三）試劑
1.A液（Acr/Bis貯備液）
稱取29.2g丙烯酰胺（Acr）、0.8g甲叉雙丙烯酰胺（Bis），溶解後定容至100mL，混合，即得A液貯備液，於4℃保存。
2.B液（4×分離膠緩衝液）
又稱下層緩衝液，為1.5mol/L、pH 8.8 Tris-鹽酸緩衝液。配製方法：稱取18.17g Tris溶於30mL蒸餾水中，用1mol/L鹽酸調節pH至8.8，再用蒸餾水定容至100mL，混合後於4℃保存。
3.C液（4×濃縮膠緩衝液）
又稱上層緩衝液，為0.5mol/L、pH 6.8 Tris-鹽酸緩衝液。配製方法：稱取6.1g Tris溶於40mL蒸餾水中，用1mol/L鹽酸調節pH至6.8，再用蒸餾水定容至100mL，混合後於4℃保存。
4.100g/L過硫酸銨（AP）溶液
稱取1.0g過硫酸銨溶於6mL蒸餾水中，稀釋至10mL。用時現配或4℃冰箱保存。
5.N，N，N′，N′—四甲基乙二胺（TEMED）
使用原液，裝入棕色玻璃試劑瓶，避光低溫保存。
6.電極緩衝液
稱取3.0g Tris、14.4g甘氨酸（Gly）、1.0g SDS溶於蒸餾水，用1mol/L鹽酸調pH至8.3，再用蒸餾水定容至100mL，使用時稀釋10倍。
7.提取緩衝液（0.1mol/L、pH 7.5 Tris-鹽酸緩衝液）
稱取1.21g Tris，溶於40mL蒸餾水中，用1mol/L HCl調節pH至7.5，再用蒸餾水稀釋，定容至100mL，混合後於4℃保存。
8.樣品緩衝液
（1）樣品緩衝液母液
1mol/L、pH 6.8 Tris-HCl緩衝液：稱取12.1g Tris，溶於40mL蒸餾水中，用1mol/L鹽酸調節pH至6.8，再用蒸餾水稀釋、定容至100mL。
50％（體積分數）甘油：量取10mL甘油，加入10mL蒸餾水，混合。
100g/L SDS溶液：稱取1.0g SDS溶於少量蒸餾水，稀釋定容至10mL，室溫保存。
10g/L溴酚藍溶液：稱取0.5g溴酚藍溶於少量蒸餾水，稀釋定容至50mL，混勻後於4℃保存。
（2）樣品緩衝液
根據方法配製樣品緩衝液，加蒸餾水定容至10mL，混勻後，於4℃保存。
9.染色液
稱取0.5g考馬斯亮藍R-250，用225mL無水乙醇、50mL乙酸（冰醋酸）溶解，再用蒸餾水稀釋、定容至500mL。
10.脫色液
取50mL無水乙醇、50mL乙酸（冰醋酸），加水至500mL。
11.標準相對分子質量蛋白質溶液
按照試劑說明書配製。
12.飽和正丁醇
13.200g/L三氯乙酸（TCA）溶液
實驗步驟
（一）樣品製備
稱取2.0～5.0g果蔬樣品組織，加入5mL提取緩衝液，研磨勻漿後於4℃、12000×g離心20min，收集上清液即為可溶性蛋白質的粗提液，於4℃保存備用。
（二）凝膠製備
1.模具安裝
取兩塊電泳玻璃板（其中一塊有凹槽，另一塊有夾條，根據所需凝膠厚度選擇1mm或1.5mm厚的夾條），用熱去汙劑洗淨後，用蒸餾水衝洗，直立幹燥。洗淨的玻璃板內麵要避免手指觸摸以防沾汙。選擇配套的1mm或1.5mm厚的膠條，並用膠條將兩側及底端封好。將玻璃板用塑料楔子固定於電泳槽上，模具安裝好後應保證三麵連續封閉。
2.配膠
根據需要選擇適當濃度值，本實驗選用100g/L的分離膠濃度。先配製分離膠（注意先不加AP和TEMED試劑）。在配製好以後，加入25μL AP溶液和5μL TEMED。
3.灌分離膠、壓線
混勻後立即沿無凹槽的玻璃板用移液器將分離膠緩緩注入膠室中，注膠過程要防止氣泡產生。膠液加到離凹槽3cm處為止，立即用移液器輕輕在膠溶液上麵鋪1cm高的飽和正丁醇或蒸餾水壓線，但不要擾亂丙烯酰胺膠麵。待分離膠上出現清晰的界麵時，表示聚合已完成。然後，用移液器小心吸出上層覆蓋的飽和正丁醇或蒸餾水。注意，吸出正丁醇後還要用蒸餾水反複衝洗膠麵數次，並用濾紙吸幹表麵殘留的水。