（9）載玻片。
（10）試管、童漢氏小管、刻度吸管等，置於幹熱滅菌箱中160℃滅菌2h。
3.培養基和試劑
（1）LTSE培養基肉湯
① 成分：
乳糖5g
胰蛋白腖20g
SDS0.5g
氯化鈉5g
磷酸氫二鈉（無水）5.74g
磷酸二氫鉀（無水）1g
微量元素溶液0.5mL
蒸餾水1000mL
② 製法：將上述各固體成分加到蒸餾水中，加熱溶解，於pH為7.0±1冷卻後再加微量元素溶液0.5mL，邊加邊搖勻，分裝入有童漢氏小管的試管各5mL。雙料成分均加倍，即將上述LTSE肉湯液濃縮2倍配製，分裝入內有童漢氏小管的試管各10mL（僅分裝30mL的供醬油及醬類檢驗用），置高壓蒸汽滅菌器中以115℃滅菌20～30min，貯存於4℃冰箱或陰涼處備用。
（2）氧化酶試劑。
（3）革蘭氏染液本方法中，除生化試劑是化學純（BR）外，所用的化學試劑均為分析純（AR）；試劑用水為蒸餾水。
4.檢驗程序
大腸菌群LTSE快速檢驗法檢驗程序。
5.操作步驟
（1）檢樣稀釋
① 以無菌操作將檢樣25mL（或25g）放於含有225mL滅菌生理鹽水的無菌瓶內，經研磨或充分振搖溶解成為1∶10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用均質器，以8000～10000r/min的速度處理1min做成1∶10的均勻稀釋液。
② 用1mL滅菌吸管吸取1∶10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內，振搖試管混勻，做成1∶100的稀釋液。
③ 另取1mL滅菌吸管，按上項操作依次10倍遞增稀釋液，每遞增稀釋一次，換用1支1mL滅菌吸管。
④ 根據食品衛生標準要求或對檢樣汙染情況的估計，選擇3個稀釋度，每個稀釋度接種3管。
（2）預測試驗將待檢樣品接種於LTSE發酵管內，10mL或10mL以上者，用雙料LTSE發酵管，1mL及1mL以下者，用單料LTSE發酵管。預測試驗采用9管法，每一稀釋度接種3管，置（37±1）℃試管內培養（15±1）h，觀察結果，如有混濁並產氣者，即表示為陽性管。
以上陽性管繼續按下列程序做證實試驗。
（3）證實試驗
① 菌液塗片：用直徑3～4mm的接種環挑取菌液2～3環進行革蘭氏染色，鏡檢。有革蘭氏陰性無芽孢杆菌，而雜菌無或少。
② 氧化酶試驗：產氣管取0.5～1mL培養物，滴加氧化酶試劑2～3滴搖勻，顯粉紅色或深紅色表示氧化酶為陽性，不變色或呈試劑的本色為陰性反應。
6.結果判斷和報告
如有產氣、氧化酶陰性並從形態上見到革蘭氏陰性的無芽孢杆菌，表示有大腸菌群存在，然後查MPN檢查表計算MPN值。
7.操作注意事項及經驗介紹
（1）檢樣要嚴格遵守操作規程，避免技術操作的差錯。由於大腸菌群是呈分裂繁殖生長，在水中往往具有聚集、分布不均勻的現象，因此在固體或液體樣品按常規法進行前處理時，應注意固體或液體樣品的稀釋，要充分溶解搖勺，使目的菌分布均勻。每次取樣加入LTSE發酵管要先將樣品混勻，避免或盡量減少取樣誤差。
（2）培養基滅菌後，童漢氏小管應無氣泡方能使用；做氧化酶試驗的小試管要清潔幹淨。
（3）本方法靈敏度高，37℃15h培養與常規法符合率基本一致（即99%～100%），超過15h可提高檢出率。
（4）初次觀察試管法氧化酶試驗難以辨別真假陽性結果，可采用氧化酶陽性結果的非腸杆菌科菌株做陽性對照，如綠膿杆菌、腦膜炎雙球菌、弧菌科菌株等。