(一)係統工作原理
VITEK對細菌的鑒定是以每種細菌的微量生化反應為基礎,不同種類的VITEK試卡(檢測卡)含有多種生化反應孔,可達30種。將人工分離的待檢菌的純菌落製成符合一定濁度要求的菌懸液,經充填機將菌懸液注入試卡內,封口後放入讀數器恒溫培養箱,根據試卡各生化反應孔中的生長變化情況,由讀數器按光學掃描原理,定時測定各生化介質中指示劑的顯色或濁度反應,然後把讀出的信息輸入電腦儲存並進行分析,再和預定的閾值進行比較,判定反應,再通過數值編碼技術與數據庫中反應文件進行比較,最後鑒定報告將在顯示器上自動顯示,並在打印機上自動打印。
儀器把30個對細菌鑒定必需的生化反應培養基固定到卡片上,經過培養後,儀器對顯色反應進行判斷,利用數值法進行判定。根據需要鑒定的微生物種類的不同,設計了不同的鑒定卡片,比如革蘭氏陰性菌卡,革蘭氏陽性菌卡,酵母菌卡等。
(二)VITEK係統的結構組成
(1)檢測卡目前VITEK係統的檢測卡有14種,常用的有7種,即:革蘭氏陽性菌鑒定卡(GPI)、革蘭氏陰性菌卡(GNI+)、非發酵菌卡(NFC)、酵母菌卡(YBC)、厭氧菌卡(ANI)、芽孢杆菌卡(BAC)、奈瑟氏菌嗜血杆菌卡(NHI),以及藥敏檢測卡等。每張檢測卡對應接種1份標本,檢測卡為一次性消耗品。
(2)充填機將待測菌的菌懸液注入試卡內。
(3)讀數器恒溫箱可在培養過程中定時讀出細菌在試卡內培養基中的生長變化值。
(4)電腦主機顯示器鍵盤打印機用於儲存和分析資料、實驗數據的分析判斷,實驗結果的自動顯示和實驗報告的打印。
(5)電源穩壓器和UPS在外圍斷電的情況下提供電腦主機約10min持續電源。
(三)VITEK係統的特點
(1)可鑒定405種細菌。
其中:GPI卡可鑒定凝固酶陽性和陰性的葡萄球菌、腸球菌、溶血鏈球菌、棒狀杆菌屬以及李斯特氏菌屬和丹毒絲菌等51種;GNI+卡可鑒定腸杆菌科、弧菌科和非發酵菌等116種;NFC卡可鑒定不動杆菌、氣單胞菌、產堿杆菌、假單胞菌、弧菌等42種;YBC卡可鑒定假絲酵母(念珠菌)、隱球菌、地黴、絲孢酵母、紅酵母等34種;ANI卡可鑒定放線菌、擬杆菌、梭杆菌、乳杆菌、真杆菌、梭菌、消化鏈球菌等94種;BAC卡可鑒定芽孢杆菌21種;NHI卡可鑒定奈瑟氏菌、嗜血杆菌、金氏菌、摩拉氏菌、布蘭漢氏菌等47種。
(2)可對澄清液體中的微生物進行計數。
(3)可測定細菌生長曲線。
總之,該係統準確率高、速度快,鑒定沙門氏菌屬隻需4h,誌賀氏菌屬6h,縮短了腸道致病菌生化鑒定的時間,操作也簡便。適用於醫療、衛生防疫、獸醫防疫、食品衛檢、動植物檢驗等單位的較大型實驗室進行細菌鑒定。
(四)係統局限性
在VITEK的最後鑒定報告上,有時也會出現一些限定信息,這些限定信息是與鑒定結果同時存在的,它闡述了合格鑒定的標準。最常見的有“Good confidence marginal separation”(好的可信性,但難於區分),即生化反應結果同時相似於數據庫中兩個菌,且產生可接受的絕對相似值,使兩種菌間難於區分,需加一些試驗方可確定其最後鑒定。例如:副溶血弧菌與嗜水氣單胞菌在NFC卡上的生化特征是相似的,當鑒定結果出現首選菌為副溶血弧菌、次選菌為嗜水氣單胞菌時,鑒定結果同時還會提示參看技術資料,技術資料則闡明通過外加VP試驗、NaCl生長試驗、七葉苷試驗來加以區別並鑒定到種。副溶血弧菌陽性百分率均為0,嗜水氣單胞菌分別為98%、100%和96%。有些菌的最後鑒定儀器不能完成,需要血清學方法證實。例如:當GNI+卡中最後鑒定報告首選菌是沙門氏菌屬、誌賀氏菌屬、霍亂弧菌、O157∶H7等,應用相應特異性抗血清進行證實。常規的微生物學診斷也要求對上述菌的最後鑒定作特異血清凝集試驗。目前,VITEK係統在對李斯特氏菌的最終鑒定上隻能達到屬的水平,對李斯特氏菌種的分類可用梅裏埃的APILISTERIA係列鑒定試劑條來完成。