此試驗方法適用於食品添加劑、食品包裝材料、飲料、微量元素、新資源食品等。
（二）試驗方法
1.動物的選擇
選擇急性毒性試驗已證明為對受試物敏感的動物種屬和品係，一般選用雌、雄兩種性別的斷乳大鼠。
2.動物分組和劑量設計
至少應設三個劑量組和一個對照組。每個劑量組至少20隻動物，雌、雄各10隻。劑量的選擇原則上高劑量組的動物在喂飼受試物期間應當出現明顯中毒症狀但不造成死亡（可為1/10～1/4LD50）；低劑量組不引起毒作用（至少是人可能攝入量的3倍），確定出最大無作用劑量。在此二劑量間再設一至幾個劑量組，以期獲得比較明確的劑量-反應關係。給予受試物的方式一般采用混於飼料中喂養，時間為30d或90d。
3.觀察指標
包括動物一般狀況觀察（如體重、食欲等）、血液學檢查、病理組織學檢查等。
（三）結果判斷
對各項指標進行統計學處理。
九、繁殖試驗
（一）目的
評價受試物對親代生殖和後代的發育與生殖的影響等一係列環節。它的依據是生殖細胞、孕體以及幼年動物對外來化合物往往比較敏感。可用於檢測那些人類長期或多世代與之接觸的外來化合物，如食品添加劑、食品和飲水汙染物等。繁殖試驗有兩代繁殖試驗和三代繁殖試驗。
（二）試驗方法
1.動物和觀察代數
一般采用大鼠，每組雌鼠為20隻、雄鼠10隻（或20隻）。觀察代數隨受檢目的而異，可作一代、二代、三代或多代觀察。
2.動物處理
設對照組、低劑量組（可按最大無作用劑量的1/30或可能攝入量的100倍）、高劑量組（為最大耐受量或有胚胎毒性的閾劑量）。受試物加入飼料或飲水中，親代和子代雌雄鼠均在斷乳後3個月接受相同劑量的飼料和飲水。3個月後雌雄交配，受孕後孕鼠繼續接觸受試物至分娩。一部分孕鼠在孕20d處死以觀察有無畸形，一部分孕鼠自然分娩。
3.觀察指標
一般健康狀況（包括體重、進食量、死亡情況、產仔總數、宮重及平均仔重）、受孕率、妊娠率、哺乳存活率（4d、21d存活）及胎兒是否出現畸形。
受孕率（%）=懷孕動物數交配雌性動物數×100
妊娠率（%）=分娩活體的動物數／懷孕動物數×100
出生存活率（%）=產後4d仔鼠存活數／出生時活仔數×100
哺乳存活率（%）=21d斷乳時仔鼠存活數／出生4d後仔鼠存活數×100
（三）結果判斷
對各項指標進行統計學處理。
十、代謝試驗
（一）原理及目的
受試物在體內可發生一係列複雜的生化變化。受試物經胃腸道吸收後通過血液轉運到全身各組織器官，再經過生物轉化生成代謝產物，原形物由各種途徑排出體外。因此，受試物原形物在體內逐漸被代謝降解而其代謝產物不斷生成。代謝試驗通過測定灌胃後不同時間內受試物原形物或其代謝物在血液、組織或排泄物中的含量，以了解該受試物在動物體內的毒物代謝動力學特征，包括吸收、分布、消除的特點，組織蓄積及可能作用的靶器官等，根據數學模型求出各項毒物的代謝動力學參數，同時采用分離純化方法確定主要代謝產物的化學結構，測試其毒性，並推測受試物在體內的具體代謝途徑。通過本實驗的觀察，對受試物在體內的生物轉運和生物轉化過程可做出正確評價，為闡明該受試物的毒作用性質與程度提供科學依據。
（二）試驗方法
1.動物
一般選用兩種性別、體重為22～28g成年小鼠或170～200g大鼠；灌胃給藥。
2.劑量
選用低於最大無作用劑量，需要時可用高、低兩種劑量；可單次或多次給藥。
3.試驗項目
進行代謝試驗前，需建立測定生物樣品中受試物含量的微量化學分析方法或標記受試物的同位素示蹤方法。測試血漿、胃腸道、主要器官和組織、尿、糞排泄物、膽汁排泄物中受試物含量或放射性水平，並采用有關分析手段如色譜、質譜及紅外光譜等分析受試物在體內的生物轉化產物。
（三）結果判斷
（1）根據吸收速率、組織分布及排泄情況，估計受試物在體內的代謝速率及蓄積性。
（2）根據主要代謝產物的結構及性質，推斷受試物在體內的可能代謝途徑以及有無毒性代謝物的產生情況。
十一、慢性毒性和致癌試驗
（一）目的
慢性毒性是指人或實驗動物長期（甚至終生）反複接觸低劑量的外來化合物所產生的毒性效應，尤其是進行性和不可逆毒性作用及腫瘤疾患。研究慢性毒性作用可通過慢性毒性試驗進行，該試驗的目的是了解經長期接觸受試物後出現的毒性作用（包括致癌作用），闡明外來化合物慢性毒作用的性質、靶器官和中毒機製，最後確定最大無作用劑量，為製定化合物質的人類接觸安全限量標準如最高容許濃度和每日容許攝入量以及進行危險度評定提供毒理學依據，為受試物能否應用於食品的最終評價提供依據。
（二）試驗方法
1.實驗動物
一般用雌、雄兩性斷乳大鼠或小鼠，對活性不明的受試物，則采用兩種性別的齧齒類和非齧齒類動物，最大限度地控製實驗動物的自然腫瘤發生率。一般實驗組可分為3～5組，要求最高劑量組的劑量能引起最小毒性但不影響其正常生長、發育和壽命，試驗組的劑量可按幾何級數或其他規律劃分，對照組除不給予受試物外其他條件均與實驗組相同。每組至少50隻動物，雌雄各半，以喂飼方式接觸受試物，嚴格控製飼料中其他因素的幹擾。一般情況下，致癌試驗試驗期小鼠為18個月，大鼠為24個月。
2.試驗動物的觀察與檢測
包括一般觀察、血液學檢查、病理檢查。
（三）結果判斷
對各項指標需進行統計學分析。