痰瘀同治方對冠心病痰瘀互結證小型豬模型中醫證候評分的影響
藥理
作者：林成仁 任建勳 李磊 任鈞國 劉光宇 劉建勳
[摘要]目的：建立冠心病痰瘀互結證小型豬模型“擬臨床”中醫證候評分方法，觀察痰瘀同治方對冠心病痰瘀互結證小型豬模型中醫證候評分的影響。方法：將36隻中國小型豬隨機分為正常對照組、模型組、舒降之組、痰瘀同治方高、中、低劑量組（生藥2.0，1.0，0.5 g·kg-1），每組6隻；除對照組外，其他各組高脂飼料喂養2周後，采用介入技術球囊損傷冠狀動脈左前降支內皮，術後繼續高脂飼料喂養8周，製備小型豬痰瘀互結證冠心病模型；術後給藥8周，根據症狀分級評分方法，分析各組動物冠心病痰瘀互結證主症、兼症、舌象和脈象評分的變化。結果：與對照組比較，模型組在高脂6周和10周時，主症、兼症、舌象和脈象評分均明顯升高（P[1]。痰瘀互結證作為冠心病的一個主要證型，一直都是中醫病證結合動物模型研究的重點之一。本研究以冠心病痰瘀互結證的臨床外在表現為基礎，在動物模型“擬臨床”研究思路指導下，建立痰瘀互結證冠心病小型豬模型，根據前期關於“痰瘀互結證動物模型中醫證候評分”研究的結果[2]，采用痰瘀同治方對證施治進行幹預，通過觀察冠心病痰瘀互結證小型豬證候評分的變化，驗證其重複性及可靠性，為其他一些病證結合動物模型的研究提供借鑒和示範，促使臨床與基礎研究的結合。
1材料
1.1動物中國實驗小型豬（Chinese experimental miniature swine，CEMS），36隻，雌雄不拘，體重15～20 kg，由北京北七家美樂養殖場提供，動物合格證號SCXK（京）2013-005。
1.2藥物與試劑痰瘀同治方（TYTZ），主要由丹參、川芎、人參等中藥組成，由中國中醫科學院西苑醫院實驗研究中心藥學室提供。舒降之（辛伐他汀）片（杭州默沙東製藥有限公司，批號）。戊巴比妥鈉（德國進口分裝，北京化學試劑公司，批號）；76%複方泛影葡胺注射液（上海旭東海普藥業有限公司，批號）；高脂飼料組成：每100 kg高脂飼料中含膽固醇2 kg，膽鹽0.5 kg，豬油10 kg，由北京科澳協力飼料有限公司提供，許可證編號SCXK（京）2009-0012。
1.3儀器MP150多導生理信息分析係統（美國Biopac公司）；BV Pulsera型C型臂X光機（荷蘭飛利浦公司）；快速交換PTCA球囊擴張導管（管徑=1.3∶1，美國Boston公司）；導引導絲，6F Cordis血管造影導管和球囊（均由美國Abbott公司提供）；ICE-CL31R低溫離心機（美國Thermo公司）；TEC-7621C型心電監護儀（日本光電）；MP-100生理記錄儀（美國Goleta公司）。
2方法
2.1痰瘀互結證冠心病小型豬模型的建立將文獻方法進行改進[3]，小型豬以高脂飼料喂養2周，每天每隻900 g，在高脂飼料喂養的基礎之上，用介入法行冠狀動脈血管內皮損傷。具體操作：耳靜脈注射戊巴比妥鈉（30 mg·kg-1）麻醉後，分離右側頸總動脈，結紮遠心端，置入6F動脈鞘管，從動脈鞘的側管注入肝素200 U·kg-1。在C型臂X光機透視下，以6F 35 L右冠導引導管置於左冠狀動脈開口行左冠狀動脈造影，觀察豬冠狀動脈的分布情況，造影後置入交換導絲，將導絲置入冠狀動脈前降支（left anterior descending branch，LAD）中部，將球囊沿導絲進入LAD中部。根據實驗動物間LAD血管直徑的差異進行球囊加壓8～12大氣壓（Atmosphere，ATM），持續30 s，反複3次，每次間隔1 min，間隔期間球囊不加壓，擴張後維持球囊壓力4～6ATM，同時輕微拉動球囊，距離約0.5～1.0 cm。完成後撤除導絲、球囊，再次造影觀察LAD擴張情況，撤除導引導管，結紮頸總動脈，傷口清創，局部給予150萬U青黴素，無菌縫合，單籠喂養觀察，術中連續心電監護。術後繼續給予高脂飼料（每天每隻900 g）喂養8周。正常對照組隻冠脈造影，不行介入損傷術，僅給予普通飼料喂養，每天每隻900 g。