在同時測定鞣花酸、異槲皮苷、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷、椴樹苷和山柰酚的分離條件中,對比不同流動相係統對鞣花酸和黃酮分離效果的影響(甲醇-水係統,乙腈-水係統和甲醇-乙腈-水係統),結果表明乙腈-水係統為流動相時,色譜峰峰寬小,被測成分分離度較好;對比流動相添加甲酸和不添加酸對化合物峰形的影響,結果表明水相加入0.1%乙酸時,被測成分峰寬較窄。
在覆盆子苷-F5的色譜條件中,考察了ELSD檢測器不同漂移管溫度(40,60,80 ℃),不同增益值(2,4,6,8)對化合物分析的影響,結果表明,漂移管溫度為40 ℃,增益值為4時,能夠獲得更好的峰形;對比不同流動相係統,及流動相加酸和未加酸對化合物分析的影響,結果表明乙腈-水係統(不加酸),能夠獲得平穩的基線和良好的分離度。
3.4結論本研究所建立的HPLC-UV同時測定掌葉覆盆子中鞣花酸和四個黃酮類化合物以及HPLC-ELSD測定覆盆子苷-F5的方法,分別在35 min和12 min內將目標化合物完全分離,方法簡單、快速,精確度和靈敏度高,能夠滿足實際樣品檢測的需要。
各化合物在不同產地覆盆子藥材樣品中的含量差異較大。藥材產地越往北(即緯度越高),其覆盆子中鞣花酸的含量越高,覆盆子中鞣花酸的產量有可能與光照時間長短有關;而東部產地(安徽、浙江、江西、湖北、福建)總黃酮含量普遍高於中西部產地(四川、貴州、湖南、廣西),在同一緯度附近,越往西則總黃酮含量越小,如福建南平的含量高於湖南衡陽。在東部產地中,緯度越高其總黃酮的含量越大;同樣在中西部產區中,緯度越高其總黃酮的含量越大。由此推測,覆盆子中總黃酮的量有可能與東西部氣候差異及日照時間有關。但結果顯示覆盆子中覆盆子苷-F5的含量在不同產地中差異較大,且無明顯規律,在被測產地中安徽亳州中的含量最高而有些產地(如遼寧本溪、貴州遵義等)未被檢出。
本文對16個不同產地覆盆子藥材中鞣花酸,異槲皮苷,山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷,椴樹苷,山柰酚和覆盆子苷-F5進行了含量測定,為覆盆子藥材的進一步研究開發以及藥材的品質評價和質量控製提供科學依據。
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