V0×CNaOH×60
L，在這個公式當中，V0表示的是在選取空白培養基作為對照滴定所用氫氧化鈉的體積數，CNaOH表示的是氫氧化鈉的濃度，60指的是醋酸的分子量，L表示的是樣品的體積。表示樣品進行發酵過程中所利用的氫氧化鈉的體積數。最後將產酸量比較高的菌株進行篩選出來，同時再進行第二次篩選。
4葡萄果醋發酵用醋酸菌鑒定分析
4.1首次鑒定
首先仔細觀察菌株接種的形態變化。在平板培養基裏進行接種的菌株，通過在32℃恒溫環境中進行培養兩天之後，利用革蘭氏染色法將獲得的單菌落進行染色，並經過鏡檢，認真觀察其染色的反應變化和形態的基本大小特點。其次進行生理生化實驗。進行實驗乙醇的過氧化和氧化。最後就是鑒定的一般措施。將待測菌株點種於鑒定培養基的平板當中，每六個菌株點種在一個平板上，培養環境中最低溫度是30℃，最高溫度是32℃，培養3～15天後，觀察菌體在3天、6天、12天及15天的時間段中的變化情況。若在菌落附近沒有透明圈產生，則未能將乙醇氧化，從而未能獲取乙酸的菌株。菌落附近有透明圈出現，則表明該菌株能氧化乙醇成乙酸。二醋酸菌的屬能需要加深氧化醋酸，讓醋酸鈣向碳酸鈣進行轉化，通過培養一定的時間之後，如果在菌落附近出現未透明的乳白色及伴有彩色光澤，這說明在液體基礎培養基裏存在乙醇氧化。此外，需要注意觀察其是否產生無菌膜。
4.2再次鑒定
菌株通過產酸性試驗及革蘭氏染色之後，並進行生理化試驗。其結果是由於在革蘭氏染色的過程中，若沒有控製好準確的時間，就會把革蘭氏陰性菌逐漸向革蘭氏陽性轉化，同時短暫的複染時間也會讓菌株的形態模糊，在顯微鏡下難以觀察分離的菌株在培養後是否伴有雜菌。但是經過在鑒定培養基平板接種並培養之後，發現有鈣圈出現在平板內，則表明陽性的乙酸氧化；然後再接著培養，若有乳白色出現在平板菌落附近，則表明是陽性乙酸氧化；在液體基礎培養基上產生菌膜，則表明該產生的菌膜試驗是陽性。通過鑒定結果可知，其分離出來的菌種均滿足醋酸菌獨有的生化特點。
5總結
總而言之，關於葡萄果醋發酵用醋酸菌的具體分離以及鑒定的分析研究，通過積極采用腐爛的葡萄皮及附近土壤作為主要的樣品，並利用各種試驗及鑒定方法，從而能夠快速獲得良好的醋酸菌。
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