飼料中呋喃唑酮測定方法
呋喃唑酮（furazolidone）又名痢特靈，是一種抗菌類物質，具有抑菌性和殺菌性，可用於防治球蟲病、細菌性痢疾等畜禽疾病，還可用作治療和預防豬、牛及家禽病的抗微生物類藥物。然而，因其在動物體內的殘留，食用魚類禁用，其他動物的使用劑量也必須嚴格控製，因此對呋喃唑酮及其殘留產物進行定量檢測十分必要。目前，世界上許多國家和地區對部分人藥、獸藥的使用及添加劑量都頒布了相應的法令和法規加以限製。例如美國的食品和藥品管理局（FDA）規定的禁用和限用的食用動物用藥包括：氯黴素、克倫特羅、己烯雌酚、硝基咪唑類物質、呋喃唑酮、硝基呋喃和一些磺胺類藥物（泌乳奶牛用）等。我國於1999年製定出《飼料和飼料添加劑管理條例實施細則》，對食用動物用藥及其劑量都有明確規定。
1呋喃唑酮的測定方法
呋喃唑酮呈黃色粉末狀，味苦，微溶於氯仿，不溶於水和乙醇，其分子量為225.16，熔點245－258℃。它是由乙醇胺經縮合反應，亞硝化、環合、還原後再經縮合而製得的。以往理論認為：呋喃唑酮是一種光敏性物質，見光易分解。目前，在分析化學領域采用紫外分光光度法能測出其最終光分解總量，結合高效液相色譜法對其光分解溶液的4種分解產物進行分析，發現僅有很小部分發生了分解；而運用質譜儀和遠紅外光譜儀也可證實呋喃唑酮一般較穩定，不易分解。下麵對呋喃唑酮的分析測定，就質量檢測法、分光光度法和高效液相色譜法分別作一介紹。
1.1質量檢測法 此法是將飼料碾碎過篩後，分別用二甲基甲酸胺（DMF）試劑和乙二胺試劑進行測試。
1.1.1 DMF測試 放9滴DMF和1滴氫氧化鉀醇溶液於白色凹盤中的3個低凹處，再將0.01g飼料試樣噴灑到每個低凹處液滴上，用顯微鏡觀察，當呋喃唑酮含量大於 25 mg/kg時，會生成易於觀測的亮藍色物質。
1.1.2 乙二胺測試把幹濾紙放在培養皿底部，並將試樣均勻地噴灑在濾紙上，再將一定量的乙二胺分布於濾紙邊緣，用顯微鏡在10X檔觀測，若有深紅色物質生成則為呋喃唑酮。然而，在動物飼料中常混有血粉，也會與乙二胺試劑反應呈深紅色而幹擾試驗，加上此法為半定量法，故存在一定的局限性。
1.2分光光度法 本法的機理是在DMF介質溶液中，呋喃唑酮與苯肼鹽酸溶液反應生成在440nm處有強吸收的亮黃色物質。因其最佳工作曲線測定範圍是0－50 mg/kg，故稱取相應質量的碾碎過篩的飼料樣品於錐形瓶中，準確加入DMF，加蓋，在水浴鍋中煮沸5 min，再置於調速振搖皿上振搖 10 min後，於快速濾紙上過濾。取一定體積的濾液酌量稀釋到容量瓶中即製得試樣。取同等體積的試樣和用DMF配製的各標準工作溶液於比色管中，向每支管中加入5mL苯肼鹽酸溶液，混勻後置於70℃水浴中25 min，再於 15℃水浴中冷卻5 min，然後準確加入甲苯到各比色管中，加蓋，振搖一定時間後將甲苯層用脫脂棉濾入比色皿中，使用分光光度計於440nm處讀取吸光值，進行測定。此法簡單易行，準確度較高，對於設施不太完善的實驗室有較好的應用價值。
1.3高效液相色譜法（HPLC） 現在據資料可查的較常用的3種HPLC法其色譜條件基本一致：采用光脈衝式泵，流速控製在 0.l－2.0 mL/min；若為進樣環則體積為 20－50 mL；紫外可見檢測器（UV）波長為365 nm；保護柱：反相柱C18或C8（柱填料粘度≤ 10μm）柱均可。這 3種方法的差異主要在於試樣的前處理，以及由此而選用的流動相和標準溶液的配製。