正文 “一測多評”法用於梔子金花丸多成分含量測定的可行性研究(3 / 3)

2.3.3 定位方法的比較

分別將3種定位方法所得結果以絕對誤差進行評價。結果表明,保留時間差法和線性回歸定位法的定位效果優於相對保留值法。

2.4 QAMS 法與外標法測定結果的比較

首先,采用外標法(external standard method,ESM)對梔子金花丸中10 種待測成分進行多成分同步含量測定,再用QAMS法建立的待測成分間的相對校正因子對其含量進行計算,並將2 種方法所得結果進行比較,以驗證QAMS 法用於梔子金花丸中不同類型化合物含量測定的可靠性。2種方法的測定結果無明顯差異,相對誤差100的情況下測得的相對校正因子較準確,重複性好,因此采用斜率法計算。

3.5 色譜峰的定位

待測成分色譜峰的準確定位是“一測多評”法成功應用的首要環節。本實驗選取了SpursilTM,Welchrom,Syncronis,Luna,TopsilTM,Diamonsil(Ⅱ),Accurasil,XtimateTM,Kromasil 等9種C18填料色譜柱分別考察保留時間差法、相對保留值法及線性回歸法對待測成分色譜峰的定位效果。結果發現,其中某些色譜柱填料對梔子金花丸供試品中個別待測成分的分離效果較差,因此在進行梔子金花丸中小檗堿、黃芩黃酮和大黃蒽醌3種不同類型化合物QAMS質量評價時,推薦使用如下4種C18填料色譜柱,分別為Spursil TM,Welchrom,Syncronis,Accurasil。

在采用線性回歸法定位待測成分色譜峰時,由於10個待測成分為3種不同類型化合物,因此在選擇校正點(n≥2)時,其中之一必須為內參物,在實際應用時,可根據現有對照品的情況靈活應用,由於內參物大黃素為蒽醌類成分,另外1或2個校正點可選擇另2類化合物中的代表性成分小檗堿或黃芩苷進行相應的二點校正或三點校正。本實驗發現,校正點的增加並未使定位結果的準確性得到相應提高,采用大黃素和小檗堿進行二點校正,定位效果較好。

線性回歸法定位待測色譜峰成功應用的前提是,在不同係統或色譜柱下所有待測成分保留時間回歸曲線的相關性良好,即r>0.999。在采用該法進行待測成分定位的同時,若結合待測成分的紫外吸收光譜和梔子金花丸的標準圖譜會使定位準確度得以大幅提高。

本研究對QAMS在中成藥含不同母核結構的化合物之間是否可行進行了探討,實驗結果證明方法可行。QAMS在未來中藥質量評價中作為適宜於中藥特點的多指標質量評價模式會得到越來越廣泛的應用。

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