2。測定方法常用的IRMA法其靈敏度和特異性高,並且不需要分離純化血漿,比RIA法快捷實用。但仍需花費5~36小時,不適用於全自動分析係統。Biosite公司的BNP-TRIAGE用於床旁快速定量檢測,以熒光標記的抗體為基礎,一份單獨樣本隻需15分鍾即可檢測完畢。Abbott公司推出的BNP試劑采用雙單克隆抗體、微粒子酶免疫法(MEIA)在Axsym儀上測定,每小時可以測定56份標本。檢測NT-proBNP主要有Roche公司的proBNP試劑。采用雙多克隆抗體、三明治夾心原理,運用電化學發光法(ECLIA)在Elecsys2010上檢測NT-proBNP,最小檢測限度可達0。6pmol/L,變異係數為2。2%~5。8%。
3。檢測標準化目前尚無BNP或NT-proBNP分析係統校準的一級參考物質。應根據美國臨床實驗室標準委員會(NCCLS)的指南,對各分析係統進行比較,確定其一致情況,尤其是在BNP100pg/ml(當前認為最適醫學決定水平)附近時的一致性。由於NT-proBNP檢測統一采用Roche的抗體和校準物質,因此其分析一致性不存在問題;而BNP檢測,比如Abbott、Bayer、Beckman等都以最早的Biosite為標準,各係統之間應盡可能一致。在檢測參考方法及一級參考物質確定前,BNP或NT-proBNP測定結果以pg/ml而不是pmol/L的形式報告。
4。參考範圍和界值由於各種BNP試劑尚未標準化,不同廠家試劑及不同測定方法所得到的結果也不盡相同。因此沒有普遍適用的參考值範圍。通常健康人的BNP濃度在3~6mmol/L。BNP和NT-proBNP水平隨年齡的增長而增高,BNP不是很明顯,而NT-proBNP較為明顯。同齡女性鈉尿肽水平高於男性。60歲以上人群鈉尿肽隨年齡增長而升高的幅度更大,其原因為老年人輕度腎功能衰退、心髒收縮功能下降以及心髒肥大、舒張功能降低。新生兒BNP濃度是成人的25~30倍,此後慢慢下降,3個月降到成人水平。CMALMB製定的“心肌標誌物的應用準則”建議:NT-proBNP的參考範圍應根據年齡(每10歲為一個年齡段)、性別分別建立,上限可定為第95或97。5百分位數。不同種族應分別確定不同的參考範圍上限。此外,腎功能、肥胖和甲狀腺功能等都可能影響BNP或NT-proBNP的濃度,對於上述人群應該分別建立沒有心衰時的參考範圍。最適界值采用ROC曲線法確定,同時進行臨床有效性評估。在應用BNP或NT-proBNP診斷心衰並評判嚴重程度時,須建立與紐約心髒病協會(NYHA)心功能分級相關的界值。