第一節 Bm134基因生物信息學分析
一、Bm134的核苷酸和其編碼的氨基酸的序列特征
Bm134（orf134）基因位於BmNPV （T3株）基因組
127342~127671 nt之間，全長330bp，編碼一個含109個氨基酸殘基的蛋白，預測分子量約為12.4kDa，在Bm134基因ATG上遊43nt有杆狀病毒晚期轉錄基序GTAAG。通過GenBank和Swiss Prot預測Bm134的保守區和功能區，沒有發現信號肽和跨膜區，但是有5個蛋白激酶C的磷酸化位點（4~6 aa、30~32 aa、65~67 aa、83~85 aa和87~89 aa），2個酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位點（15~18 aa和44~47 aa）。
二、Bm134的同源性分析
利用Swiss PORT的Blast搜索Bm134的氨基酸序列後發現，Bm134的氨基酸序列相對保守。已經測序的杆狀病毒基因組中有13種杆狀病毒編碼的蛋白有Bm134的同源序列，這些蛋白和Bm134的同源性介於31%~93%之間，其中與AcMNPV的ORF5的同源性最高，達到了93%（圖551）。與IrfaNPV的同源性最低，隻有31%。
第二節 Bm134在BmN細胞中的轉錄、表達和蛋白的定位
一、Bm134的轉錄時相轉錄時相
從感染了BmNPV不同時間的BmN細胞提取總RNA，進行RT PCR。用Bm134特異性引物進行PCR，結果顯示從感染病毒後24小時開始，樣品中出現了一條約為180 bp的條帶，該轉錄本一直持續到感染後72小時。同時，315 bp的ie1的轉錄從感染後3小時開始也檢測到，直到72小時。而193 bp的p10的轉錄直到感染後24小時才檢測到。上述結果表明Bm134可能是一個晚期基因。
氨基酸序列比對用Clustal W和Cenedoc軟件。用3個陰影水平來表示它們之間的同源性高低,黑色表示100%同源，深灰表示80%同源，淺灰表示60%同源。
在感染後的不同時間（0小時、6小時、12小時、24小時、36小時、48小時和72小時）提取總RNA，進行RT PCR。時間點顯示在上，不同基因顯示在左，片段大小顯示在右。
在感染後的不同時間（0小時、6小時、12小時、24小時、36小時、48小時和72小時）提取總RNA，進行qRT PCR。
二、Bm134的表達時相
為了進一步確定蛋白在感染細胞中的表達情況，收取了BmNPV感染的BmN從0小時、6小時、12小時、24小時、36小時、48小時和72小時的細胞樣品，用Bm134多克隆抗體進行Western blot分析，確定了該蛋白在病毒感染細胞中的表達時相。結果發現在感染後24~72小時的細胞中均有一條大小為12.5 kDa的特異蛋白質帶能與Bm134抗體發生特異性反應，而且大小與無His的Bm134蛋白的雜交的結果一致。上述結果表明該蛋白從24小時開始可以檢測到，是一個晚期表達的蛋白。
在感染後的不同時間（0小時、6小時、12小時、24小時、36小時、48小時和72小時）收集細胞樣品進行Western blot雜交，一抗為Bm134多克隆抗體，雜交信號以DAB顯色。M表示蛋白標準分子量。
三、Bm134的亞細胞定位
為了確定Bm134的亞細胞定位，用BmNPV感染BmN細胞，分別在感染後24小時、48小時、72小時收集細胞，用Bm134的抗體和羊抗兔的二抗進行免疫雜交後，用激光共聚焦顯微鏡進行觀察。結果顯示在24小時時熒光主要集中在細胞質中，而在48小時時細胞質和細胞核上均有熒光，到達72小時後幾乎整個細胞都顯熒光。