（4）流水充分衝洗，洗除Bouin液黃色。
（5）Weigert鐵蘇木精染核10分鍾。
（6）流水衝洗10分鍾。
（7）用三色液染15～20分鍾。
染液的配製：鉻變素2R（Chromotrope 2R）0.6g，光綠SF（Light green SF yellowish）（或堅牢綠Fastgreen FCF）0.3g，冰醋酸1ml，磷鎢酸0.8g，蒸餾水100ml，配製後4℃冰箱貯存。
（8）染色後以0.5%醋酸水溶液分色2分鍾。如染色過深可改用1%醋酸加0.7%磷鎢酸分色。
（9）脫水，透明，合成樹脂封固。
結果：肌纖維及細胞質呈紅色，膠原纖維呈綠色（如用苯胺藍替代光綠或堅牢綠則為藍色），細胞核呈藍黑色。
二、磷鎢酸蘇木精快染法
染色步驟：
（1）取材，Helly液或其他固定液固定，石蠟切片。
（2）切片下行入水。
（3）入碘液10分鍾，每次用後須換新液。
染液的配製：碘化鉀2g，碘1g，先用蒸餾水4～5ml將碘化鉀溶解，再放入碘，待全溶後加蒸餾水至200ml。
（4）入5%硫代硫酸鈉液5分鍾，用後換新液。注意：即使組織固定於未含汞劑的固定劑，也必須進行第3及第4兩步過程。
（5）流水衝洗5分鍾。
（6）在PTAH染液中染色，60℃，約1小時。
染液的配製：磷鎢酸蘇木精（PTAH）染液以下的三種配製法，可任選一種使用。
1）蘇木紅（hematein）0.5g，磷鎢酸5.0g，蒸餾水500ml。先用100ml蒸餾水溶解蘇木紅，再將400ml蒸餾水溶解磷鎢酸。待全溶後將二者混合，貯於褐色瓶內，封口。24小時以後即可染色。此液保存期不長。
2）蘇木精0.5g，磷鎢酸5.0g，蒸餾水500ml，0.25%高錳酸鉀水溶液25ml。將蘇木精置於100ml蒸餾水內，略加熱使其全溶。將磷鎢酸加入30ml蒸餾水內溶解。待蘇木精液冷卻後，再將二者混合，隨即加高錳酸鉀液，並將蒸餾水加至500ml。此液以貯存1周後使用較好，染液不能長期存用。
3）蘇木精0.5g，磷鎢酸10g，蒸餾水500ml。同上法，蘇木精略加熱溶於蒸餾水，再將磷鎢酸溶解，二者混合後靜置約1個月或稍久即可長期使用。
（7）快速脫水
經兩次95%酒精及兩次無水酒精，二甲苯透明，合成樹脂封固。
結果：橫紋肌橫紋、平滑肌、核、細胞質、纖維蛋白、角蛋白等呈色調不等的藍色。膠原、網狀纖維、基膜及軟骨皆呈紅至紅褐色。對橫紋肌，所有的橫紋均能顯示清晰。
三、磷鎢酸蘇木精慢染法
染色步驟：
（1）取材，組織以Zenker液固定，常規處理。
（2）石蠟切片，下行入水。
（3）碘液5分鍾。
染液的配製：碘化鉀2g，碘1g，蒸餾水100ml，配法同前。
（4）5%硫代硫酸鈉液5分鍾。
（5）流水衝洗5分鍾。
（6）0.5%高錳酸鉀液5分鍾。
（7）流水衝洗3分鍾後，再經蒸餾水漂洗。
（8）經5%草酸液除色4分鍾。
（9）流水衝洗後，蒸餾水漂洗。
（10）經4%鐵礬液媒染，室溫1小時。
（11）流水及蒸餾水洗。
（12）PTAH染色，在暗處，室溫12～24小時。
（13）快速脫水，透明，封固。
結果：同上法。
四、Ralis等（1977）肌纖維染色
本法可供肌纖維定量形態測定研究使用。
染色步驟：
（1）用10%中性甲醛液或甲醛生理鹽水固定，石蠟切片。切片烘幹，脫蠟，下行入水。
（2）在2%煌猩紅（brilliant crystal scarlet 6R或ponceau 6R，或acid red44）的1%醋酸水溶液內，37℃染30分鍾。
（3）經1%醋酸水溶液速漂洗。
（4）以0.5%磷鎢酸水溶液分色1～2分鍾。
（5）1%醋酸水溶液漂洗。
（6）用0.5%酒石黃（tatrazine或foodyellow4）的1%醋酸水溶液複染30秒鍾。
（7）經3次無水酒精漂洗並脫水，常規透明，封固。
結果：肌纖維呈紅色，結締組織呈黃色，核和紅細胞呈橘紅色。
五、Retterer法顯示橫紋肌
染色步驟：
（1）升汞飽和液固定，石蠟切片。
（2）入1%煌黑3B水溶液染1～5分鍾，該液每30ml加冰醋酸15滴。
（3）蒸餾水速洗，入1%甲苯胺藍或沙黃水溶液染5～15分鍾。
（4）用濾紙吸幹，無水酒精鑒別，若不易褪色，改用無水酒精和甲醇等份混合液鑒別較快。
（5）經二甲苯透明，樹膠封固。
結果：間板呈藍色，橫紋呈淡藍色或紅色。
六、Schaffler肌原纖維、網狀纖維及膠原纖維同時顯示法
染色步驟：
（1）甲醛-酒精固定，冷凍切片。
（2）切片入5%單寧酸95%酒精溶液於55℃浸10～15分鍾。
（3）酒精洗片刻，再用蒸餾水洗片刻。
（4）銀浸還原，移至氨銀溶液（3份），在第一份氨銀內切片呈淡黃色時，立即移至第二份氨銀，至切片呈黃色；再移至第三份氨銀，至切片呈深黃色為止。切片於氨銀內須用玻棒來攪動，氨銀需常更換。
氨銀液配法：取10%硝酸銀水溶液30ml，加40%氫氧化鈉水溶液40滴，即可產生沉澱。待沉澱完全下沉後將浮液傾去，用蒸餾水1000～1500ml將沉澱洗10～12次，最後加蒸餾水50ml，滴加氨水至沉澱溶解為度。用蒸餾水補滿該液為150ml，置棕色瓶內保存。用前以10倍的蒸餾水稀釋。若切片呈淡青黃色，需增加氨銀的濃度。用5倍蒸餾水稀釋，切片呈棕色為適合。
（5）入0.02%苦味酸水溶液鑒別（若浸漬適當則無需鑒別）。
（6）自來水衝洗多次。
（7）於0.5%～1%氯化鉑水溶液加入0.1%冰醋酸，浸潤片刻，此步可省略。
（8）蒸餾水洗，入下液複染。
染液的配製：苦味酸飽和水溶液90ml，5%酸性複紅10ml。
（9）蒸餾水洗，用濾紙吸幹，經酒精、二甲苯封固。
結果：肌原纖維呈黃色，網狀纖維呈黑色，膠原纖維呈紅色。此法對肌腱交界的染色亦有良好的結果。