下篇 預防與治療 第8章 如何診斷艾滋病(3 / 3)

5.夾心法此方法是將提出的艾滋病病毒抗體包被在玻片上,加入待檢血清後,所加入血清中含有的艾滋病病毒抗原即刻被下層的艾滋病病毒抗體固定,洗滌後加入用酶標記的同種抗體,在抗體之上又形成了一層有酶的抗體,之後加入底物液即可顯色,從而可以讀出檢測結果。

6.原位雜交原位雜交法檢測艾滋病病毒的特異性極高,但是非常繁瑣。艾滋病病毒感染者的體內和組織細胞中常常含有艾滋病病毒或整合入細胞基因中的前病毒。用放射性核素標記克隆後的艾滋病病毒的DNA片段,與病人血細胞或組織切片進行核酸雜交,經過放射後會自動顯現,即可以顯示出艾滋病病毒感染細胞的原始部位。

七、艾滋病病毒感染檢測的具體應用

用於艾滋病病毒檢測的方法很多,不同的病毒檢測方法適用於艾滋病病毒的不同時期和不同類型,因此,在檢測艾滋病病毒的時候,要因地製宜,注意根據不同的時期和類型,選擇適當的檢測方法。

(一)不同的檢測方法各有千秋

不同的檢測方法所適用的檢測人群、艾滋病病毒類型各不相同,而且他們的敏感性、特異性也不相同,因此,不同的檢測方法各有千秋。

1.艾滋病病毒分離艾滋病病毒分離方法在諸多檢測方法中是特異性最高的方法。

2.聚合酶鏈反應聚合酶鏈反應是檢測方法中最為敏感的方法,即使是處於潛伏期的患者也難逃聚合酶鏈反應的“法眼”。

3.蛋白印痕實驗蛋白印痕實驗主要用於確定檢測陽性結果,是一種特異性較高的檢測方法。

4.酶聯免疫吸附試驗酶聯免疫吸附試驗主要用於艾滋病病毒的初篩試驗,敏感性較高,成本較低,但是需要重複試驗才能夠確診。

(二)檢測方法適用差異性

1.初篩檢測與確診檢測各不相同初篩檢測方法主要用於艾滋病病毒的最初檢測,如果通過初篩檢測方法重複試驗之後,發現檢測結果仍然為陽性,就需要進一步診斷;而確診檢測就是對初篩檢測結果的確定,如果確診檢測結果仍然為陽性,則表明為艾滋病病毒抗體陽性。

2.病毒類型不同,檢測方法不同不同的艾滋病病毒類型,所需要的檢測方法也不相同,病毒類型與檢測方法是一一對應的關係,一般說來,一種檢測方法隻能檢測一種病毒類型。

導致艾滋病的病毒主要有HIV-1型和HIV-2型,這兩種不同的病毒抗體不能夠交叉,隻有少數抗體能夠交叉,因此,一種檢測方法隻能檢測一種病毒類型。

3.檢測人群不同,檢測方法不同

(1)高危人群與普通人群檢測方法的區別:雖然檢測方法的敏感性和特異性非常重要,但是檢測結果的正確率也不容忽視,檢測結果的正確率是由陽性值或陰性值確定的,而這種陽性值和陰性值既受到檢測方法本身敏感性和特異性的影響,也受到檢測人群的影響。一般說來,對高危人群,如性生活混亂者、同性戀者的檢測方法的準確率較高,那麼,對普通人群的檢測方法則較低。反之,如果對高危人群的準確率較低,那麼,對普通人群的準確率則較高,它們之間是此消彼長的關係。

(2)對母親感染艾滋病病毒的新生兒的檢測:如果母親已經感染了艾滋病病毒,那麼新生兒則有較大的感染艾滋病病毒的概率。通常情況下,不使用艾滋病病毒抗體檢測的方法,因為母親的艾滋病病毒抗體可以在新生兒體內保留一年半,常用檢測艾滋病病毒基因的方法來檢測艾滋病病毒。

八、其他檢測艾滋病病毒感染的方法

常用的其他檢測艾滋病病毒感染的方法主要是對淋巴細胞、唾液和尿液進行檢測。

(一)淋巴細胞檢測

1. B淋巴細胞檢測

(1)檢測原理:通過檢測B淋巴細胞可以檢測艾滋病病毒感染狀況,這是因為當人體受到艾滋病病毒感染時,B淋巴細胞也會出現異常。

(2)檢測方法

①檢測對美洲陸商的反應:如果反應較弱,則說明B淋巴細胞減少,人體有可能感染艾滋病病毒。

②檢測對金黃色葡萄球菌的反應:如果反應較弱,則說明靜止性B淋巴細胞的數量較少,人體有可能感染艾滋病病毒。

2.T淋巴細胞檢測

(1)檢測T淋巴細胞的數量

①檢測標準:一般說來,健康人體內的T淋巴細胞的數量為每立方微米大於800個,而艾滋病病毒感染者每立方微米淋巴細胞的數量少於500個。

②檢測方法:可以使用人工計數法進行檢測,這種方法指的是通過單克隆抗體熒光染色法對體細胞進行分群,然後再使用熒光顯微鏡進行計數,這種檢測方法較為簡單,但是誤差較大、速度較慢;檢測人員還經常使用流式細胞儀進行檢測,這種檢測方法主要是通過流式細胞儀進行計數,它是激光、單克隆抗體、免疫熒光、電腦等的綜合體,檢測誤差較小、正確度較高、速度也比較快,是一種比較優良的檢測方法。

(2)T淋巴細胞功能檢測:當人體感染艾滋病病毒時,不但T淋巴細胞的數量發生變化,而且,它的功能也會發生變化,它的主要檢測方法如下:

①檢測外周血淋巴細胞的數量和功能:如果外周血淋巴細胞的數量減少或者對植物血凝素的反應減弱,說明T淋巴細胞的功能出現了異常。

②抗原皮膚試驗檢測:可以通過結核菌素純化蛋白衍生物和鏈激酶-鏈道酶等抗原皮膚試驗進行檢測,如果試驗結果為陰性,即無反應,則有可能感染艾滋病病毒。

(二)尿液檢測

1.檢測原理尿液中含有濃度較高的艾滋病病毒,則容易被檢測出來。

2.優缺點尿液檢測方法較為簡單、取樣方便,比較省時省力,但是這種檢測方法僅僅為初級檢測方法,需要進一步的確診。

(三)唾液檢測

(1)收集唾液:將唾液收集器上的尼龍球放入患者口腔中,等到尼龍球濕潤之後,將尼龍球放入收集器內,通過擠壓尼龍球,使得唾液進入檢測卡的標本孔內,然後選擇在比較適宜的光線下觀察實驗結果。

(2)判斷標準:如果出現藍色,則表明是陽性的,那麼,艾滋病病毒感染的可能性較大。

(3)主要缺點:唾液檢測方法取樣方便,簡單易行,成本較低,而且具有較高的特異性和敏感性。但是有可能出現可疑反應和非特異性反應,如果檢測結果為陽性,也還需要做進一步的檢測。

九、艾滋病應與哪些疾病相鑒別

艾滋病表現的症狀多種多樣,且有多種不確定的臨床症狀;同時臨床上有許多疾病與艾滋病有著相同或類似的症狀;所以,艾滋病的診斷一定要慎重,診斷時要注意鑒別。

1.艾滋病的血液學和免疫學的改變,應與單核細胞增多症或其他引起免疫功能抑製的疾病相鑒別。

2.艾滋病通過性接觸傳播,應與淋病、梅毒等傳統性病相區別。傳統性病沒有免疫學改變,用通常的檢查方法就能診斷並相對容易治療。

3.艾滋病所表現的發熱、消瘦、疲憊乏力等要與其他感染類疾病,如結核病、自身免疫類疾病、膠原類疾病以及血液病的某些症狀相鑒別。

4.艾滋病病人會有皮疹、全身瘙癢及尖銳濕疣等表現症狀,尤其有卡波西肉瘤時有皮膚破損,出現粉紅色或深紫色瘀斑、結節等改變,需要與黏膜紫癜、白血病等表現的某些皮膚病症狀相鑒別。

5.淋巴結腫大,應與由於卡波西肉瘤、霍奇金病、淋巴瘤、血液病等引起的淋巴結腫大相鑒別,尤其要注意與良性性病性淋巴結病綜合征相鑒別。其表現為多處淋巴結無痛性腫大,長達6個月以上;並伴有發熱、頭痛、咽痛、疲憊不適、體重減輕、脾大等症狀;淋巴結活檢為良性反應性濾泡增生,在濾泡間及淋巴竇內能見到免疫母細胞和血管增生,近半數有淋巴細胞數量減少,皮膚測試60%左右呈現陽性反應,血清學檢查顯示多種病毒感染等。

6.應與“恐艾綜合征”相鑒別,在國外同性戀者中,出現過有過分恐懼艾滋病的神經症狀的人群,他們表現出與艾滋病早期相類似的症狀,如抑鬱、嗜睡、疲憊乏力等,但缺乏艾滋病的任何診斷依據,屬於心理疾病,通過心理治療便能夠很快消除。