(2)主要儀器恒溫水浴。
(3)主要試劑
①0.1mol/mLNaOH溶液:稱4g氫氧化鈉溶於1000mL蒸餾水中。
②1%酚酞指示劑。
(4)檢驗方法用移液管吸取混合均勻的待檢乳和正常牛乳各10mL,分別放入2個錐形瓶中,然後各加入酚酞指示劑5滴,用0.1mol/mLNaOH溶液滴定至呈微粉紅色,給錐形瓶蓋上棉塞,在80℃水浴中滅菌10min。冷卻後,用吸量管向2個錐形瓶中各加入酸敗乳0.5mL,蓋上棉塞,搖勻,在25~27℃下放置4~6h。
向2個錐形瓶中各加入20mL蒸餾水,用0.1mol/mLNaOH溶液滴定至粉紅色在1min內不退色為止,如待檢乳所消耗的氫氧化鈉體積明顯地小於正常乳,則說明待檢乳中摻有抗菌素或防腐劑。
(十二)牛乳摻防腐劑的檢驗
在牛乳中摻入的防腐劑一般有硼酸(或硼砂)、苯甲酸(或苯甲酸鈉)、水楊酸(或水楊酸鈉)、甲醛、過氧化氫等。
1.硼酸和硼砂的檢驗
(1)原理硼砂會使薑黃試紙呈紅色,用氨氣熏蒸後試紙變為綠色,再用濃鹽酸熏蒸後又變為紅色。
(2)主要試劑
薑黃試紙:取25g薑黃,溶於500mL乙醇中,形成飽和溶液。濾去不溶殘渣,用薑黃的飽和醇溶液將濾紙浸濕後於無氨的房中晾幹,剪成紙條備用。
(3)檢驗方法取牛乳100mL,加入濃鹽酸7mL,攪拌均勻,將薑黃試紙浸入,取出任其自然幹燥。如果薑黃試紙呈現紅色,用氨氣熏蒸以後試紙變為綠色,再用濃鹽酸熏蒸後又變為紅色,表示有硼酸或硼砂存在。
此反應非常靈敏。如果幹燥後,薑黃試紙仍呈黃色,用氨氣熏蒸以後試紙變紅,再用濃鹽酸熏蒸後又呈黃色,則表示無硼酸或硼砂存在。
2.苯甲酸和水楊酸的檢驗
(1)樣液的製備苯甲酸、水楊酸及其鹽類在酸性條件下可隨水蒸氣餾出,在檢驗苯甲酸、水楊酸及其鹽時,應首先取得它們的餾出液。
①主要儀器:蒸餾裝置。
②主要試劑:硫酸溶液(1+4)、飽和氯化鈉溶液。
③操作步驟:在蒸餾燒瓶中加入25mL待檢乳樣、4mL 硫酸溶液(1+4)硫酸溶液和80mL飽和氯化鈉溶液,加入一小塊沸石,然後裝成蒸餾裝置。用酒精燈加熱蒸餾燒瓶,同時收集餾出液至50~60mL,停止加熱,餾出液用於檢驗苯甲酸和水楊酸。
(2)苯甲酸的檢驗
①原理:苯甲酸經硝化後可形成3,5-二硝基苯甲酸,該化合物被還原後可產生紅棕色的3,5-二氨基苯甲酸。
②主要試劑:
10%氫氧化鈉溶液。
硫化銨溶液:向20mL濃氨水中通入硫化氫至不再吸收為止,然後向此溶液中加入濃氨水20mL,用蒸餾水稀釋至100mL。此試劑不宜保存,應在臨用時配製。
③檢驗方法:取餾出液10mL和10%氫氧化鈉溶液0.5mL於蒸發皿中,蒸幹。冷卻後在殘渣中加入濃硫酸1mL和硝酸鉀0.1g,於沸水浴上加熱20min,放冷。向蒸發皿中加入蒸餾水2mL及濃氨水10mL(用試紙檢驗,應呈顯著堿性)煮沸後放冷,將溶液轉移到試管中。傾斜試管,小心地沿管壁加入新製備的硫化銨溶液約5mL,應使液體分成兩層,勿使混合。如果在兩層液體界麵處有紅棕色輪帶出現,則證明有苯甲酸存在。
(3)水楊酸的檢驗
①主要試劑:1%三氯化鐵溶液;10%氫氧化鈉溶液;醋酸溶液(1+1);10%硫酸銅溶液。
②檢驗方法:取上述蒸餾液1mL,加入1%三氯化鐵溶液1滴。若無紫色出現,則證明不存在水楊酸及其鹽。如有紫色出現,應按下述方法進行確證。
取上述蒸餾液20mL,加入10%氫氧化鈉溶液4~5滴,醋酸溶液(1+1)4~5滴及10%硫酸銅溶液1滴,混合均勻後加熱煮沸0.5min,放冷。若出現磚紅色,可確認有水楊酸及其鹽存在。
3.甲醛的檢驗
甲醛有極強的活性,能使蛋白質變性,有很強的殺菌作用。含有甲醛的乳不能供食用。
(1)原理甲醛與濃硫酸反應,可生成紫色物質。
(2)主要試劑含有硝酸的濃硫酸(在100mL濃硫酸中滴入1滴濃硝酸)。
(3)檢驗方法在試管中加入待檢乳5mL,傾斜試管,沿管壁小心加入含有硝酸的濃硫酸約2mL,應使液體分成兩層,勿使混合。如果在兩層液體界麵處出現紫色環,則證明牛乳中摻有甲醛。
4.過氧化氫的檢驗
(1)原理過氧化氫與釩酸試劑發生反應,生成紅色物質。本法可檢出牛乳中0.01%的過氧化氫。
(2)主要試劑
①40%三氯乙酸溶液。
②礬酸銨溶液:取1g礬酸銨溶於100mL 稀硫酸(1+3)中。
(3)檢驗方法在試管中加入待檢乳5mL,向其中滴加40%三氯乙酸溶液,邊加邊搖,至牛乳中蛋白質凝固結塊,放置5min後過濾。向濾液中加入礬酸銨溶液2~3滴,搖勻,如出現穩定的紅色,表示有過氧化氫存在。
過氧化氫容易分解,所以此項檢驗的精確性與待檢乳的存放時間有關。
二、摻假乳粉的檢驗
乳粉有全脂乳粉、全脂加糖乳粉和脫脂乳粉三種。除全脂加糖乳粉可以加入20%的蔗糖外,其他乳粉均不得加入蔗糖。
(一)乳粉中蔗糖含量的測定
(1)原理將樣品脫脂、除去蛋白質等雜質,再用鹽酸進行水解,使蔗糖轉化為還原糖。然後按還原糖測定方法分別測定水解前、後樣品液中還原糖含量,兩者差值即為由蔗糖水解產生的還原糖量,乘以換算係數即為蔗糖含量。
(2)主要儀器滴定管(酸式)。
(3)主要試劑濃鹽酸;30%氫氧化鈉溶液。
其餘試劑與滴定法測牛乳中乳糖含量所用試劑相同,參見本章第二節。
(4)檢驗方法
①未經水解的還原糖含量的測定:精確稱取2.5~3.0g乳粉於燒杯中,分數次每次用蒸餾水約25~30mL將其溶解並轉移到250mL的容量瓶中。向容量瓶中緩慢、精確地加入醋酸溶液5mL及亞鐵氰化鉀溶液5mL,用蒸餾水稀釋至刻度。上下翻轉容量瓶,使之混合均勻,靜置5~10min後,用幹燥漏鬥和幹燥濾紙過濾。濾液收集於幹燥的容器中,棄去最初的約20mL濾液。往收集的濾液中加入少量無水草酸鉀(或草酸鈉)粉末,再用幹燥容器過濾,將濾液收集,供檢測用。
將濾液裝到滴定管中,用標準費林試劑滴定。滴定方法及注意事項參見本章第二節(五、牛乳中乳糖含量的測定)。
②水解後還原糖含量的測定:稱取10g待檢乳粉於錐形瓶中,加入蒸餾水90mL,攪勻後,於90℃的水浴中加熱3~5min,取出冷卻,供檢驗用。
吸取乳粉樣品的濾液50mL於100mL容量瓶中,加入濃鹽酸5mL,搖勻,置於70℃的恒溫水浴中,至瓶內溫度超過68℃時,保溫8min。在保溫期間,應不斷振搖容量瓶。保溫後取出,將容量瓶浸到冷水中,當溫度冷至35℃時,用30%的氫氧化鈉溶液中和至中性(用pH試紙檢驗),加水至刻度,在20℃的水浴中保溫30min。
將轉化後的糖溶液裝入滴定管中用標準費林試劑滴定。滴定方法及注意事項參見本章第二節(五、牛乳中乳糖含量的測定)。
(5)蔗糖含量的計算
蔗糖含量(g/100g)=(R2-R1)×0.95
式中0.95——還原糖換算為蔗糖的係數
R2——水解後還原糖的含量,g/100g
R1——未經水解的還原糖含量,g/100g
(二)乳粉中摻偽物質的檢驗
乳粉中摻偽的物質有的來源於原料牛乳,有的是直接向乳粉中添加的。所以,在牛乳中可能出現的摻偽物質,在乳粉中都有可能出現。乳粉中摻偽物質的檢驗同牛乳中摻偽物質的檢驗。
思考題
1.如何從感官上鑒定消毒牛乳的質量?
2.通過牛乳的常規檢驗,如何對牛乳的品質作出判斷?
3.牛乳中常見的摻偽物質有哪些?
4.哪些理化指標可以鑒別全脂乳粉的質量?
5.何為乳的總酸度?正常鮮牛乳,其酸度不得大於多少?
6.簡述鮮、陳乳的鑒別原理。