供試品溶液的製備：取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取0.7g，精密稱定，或取重量差異項下的大蜜丸，剪碎，取1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，密塞，稱定質量，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）15min使溶散，加熱回流1h，放冷，再稱定質量，用50%甲醇補足減失的質量，搖勻過濾。精密量取續濾液10mL，置中性氧化鋁柱（100～200目，4g，內徑1cm，幹法裝柱）上，用40%甲醇50mL洗脫，收集流出液及洗脫液，蒸幹，殘渣加50%甲醇適量使溶解，並轉移至10mL容量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含山茱萸以馬錢苷（C17H26O10）計，水蜜丸每1g不得少於0.70mg；小蜜丸每1g不得少於0.50mg；大蜜丸每丸不得少於4.5mg。
（2）牡丹皮照高效液相色譜法（《中國藥典》2005版附錄Ⅵ D）測定。
色譜條件與係統適用性試驗：以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，以甲醇-水（70∶30）為流動相，檢測波長為274nm。理論板數按丹皮酚峰計算應不低於3500。
對照品溶液的製備：取丹皮酚對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每1mL含20μg丹皮酚的溶液，即得。
供試品溶液的製備：取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取0.3g，精密稱定，或取重量差異項下的大蜜丸，剪碎，取0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，密塞，稱定質量，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）45min，放冷，再稱定質量，用50%甲醇補足減失的質量，搖勻，過濾，取續濾液，即得。
測定法：分別精密吸取對照品溶液10μL與供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品含牡丹皮按丹皮酚（C9H10O3）計，水蜜丸每1g不得少於0.9mg；小蜜丸每1g不得少於0.70mg；大蜜丸每丸不得少於6.3mg。
【規格】大蜜丸每丸重9g。
3.六味地黃丸免疫作用
六味地黃丸對免疫力低下小鼠炭粒廓清速率實驗：取ICR健康小鼠稱重，隨機分為6組，每組10隻。即0.5g/kg、1g/kg、2g/kg六味地黃丸劑量組，1g/kg黃芪多糖陽性對照組，空白對照組和模型組給予等量生理鹽水。上述各組均灌胃給藥，除正常對照組外，其餘各組皮下注射氫化可的鬆50mg/kg，1次/d，連續6d，造成免疫功能低下模型，同時給予藥物，連續7d。於末次給藥後0.5h，於各鼠尾靜脈注射經稀釋的印度墨汁5μL/g，於1min和5min後（分別記做t1和t5），分別從眼眶靜脈取血20μL，加到1g/L Na2CO3溶液2mL中搖勻，用分光光度計在680nm處測定1min和5min的吸光度，分別記做A1、A5，計算廓清指數K；之後，將小鼠放血處死，取肝髒及脾髒稱質量，計算吞噬指數α。
廓清指數K=（lgA1-lgA5）/（t5-t1）=lg（A1/A5）/4；
吞噬指數α=K1/3×小鼠體重/（肝重量+脾重量）
五、考核標準
優秀：操作熟練、規範；能夠完成六味地黃丸的製備和質量分析，了解免疫作用藥理實驗方法以及六味地黃丸的藥理作用。
合格：操作基本熟練、規範；基本能夠完成六味地黃丸的製備和質量分析，基本了解免疫作用藥理實驗方法以及六味地黃丸的藥理作用。
不合格：操作不熟練、不規範；不能夠完成六味地黃丸的製備和質量分析，不了解免疫作用藥理實驗方法以及六味地黃丸的藥理作用。