一、實訓目標
(1)學會用家兔膽汁引流法觀察利水滲濕藥對家兔膽汁分泌影響的實驗方法。
(2)了解茵陳蒿湯對家兔膽汁分泌影響的作用機理。
二、實訓原理
肝髒分泌的膽汁經膽總管流入十二指腸,膽汁是一種重要的消化液,含有多種化學成分,主要有膽酸、膽固醇及膽紅素等。膽汁的分泌排泄與黃疸的形成有密切關係。從膽總管收集膽汁可以反映膽汁的分泌與排出。茵陳蒿湯具有清濕熱,退黃疸功效,使膽汁流出增加。本實驗可動態觀察藥物對肝分泌膽汁的影響。
三、主要儀器、試藥及實驗動物
儀器和用具:兔解剖台、總膽管引流用塑料管(長20~30cm)、剪毛刀、血管鉗、眼科鑷、注射器、5號針頭、紗布、藥棉、絲線、台秤。
試藥:茵陳蒿湯水煎醇沉液2g/mL(茵陳60g、梔子9g、大黃9g水煎成36mL)、生理鹽水、鹽酸山莨菪堿注射液5mg/mL、甲基硫酸新斯的明注射液0.5mg/mL、烏拉坦溶液0.25g/mL。
實驗動物:家兔1隻。
四、實訓內容與步驟
取禁食8~12h家兔1隻,用烏拉坦1g/kg腹腔注射麻醉後,仰位固定於兔解剖台上。上腹部剪毛,從劍突下腹部正中線切開皮膚6~10cm。沿正中腹白線切開腹壁,找到胃幽門部及其相連的十二指腸。用手指輕輕翻轉幽門及其相連的十二指腸上部,可見開口於十二指腸的膽總管壺腹部,並可向右上方追蹤到膽總管。用眼科鑷分離出膽總管一小段,在膽總管下穿二根絲線。先在膽總管離十二指腸壁1.5cm處結紮一根絲線,不剪斷,用作牽引膽總管用。提起牽引絲線,由於膽總管已被結紮阻斷,可見上段膽總管內充滿綠色膽汁。在牽引絲線上方0.2~0.3mm處剪開膽總管一小口,插入內徑為1~2mm的膽汁引流用塑料導管深2~3mm,結紮固定,通過此引流導管將膽總管內膽汁引流出體外,用量杯可計數流出的滴數或體積(mL)。每藥均觀察給藥前10min及給藥後膽汁流量(滴/min或mL/10min)。
五、注意事項
(1)膽總管引流膽汁的塑料管可用頭皮針上的半透明塑料管製成。管的尖端剪成斜口,離管口2~3mm處加熱拉成稍細的頸部,以便結紮膽總管而固定之。
(2)開腹手術中遇有出血點,用絲線結紮止血。
(3)膽總管比較細,切勿用力拉牽引線而拉斷,操作必須細心輕巧。
(4)膽總管切口應一次成功,正好剪斷膽總管的1/3~1/2。注意一定要剪斷內膜,使膽汁引流管插入內腔,見有膽汁流出便易插入導管。
六、考核標準
優秀:能學會實驗方法基本原理,操作熟練,方法正確,結果統計處理正確。
合格:理解實驗方法基本原理,操作正確,結果統計處理正確。
不合格:不理解實驗方法基本原理,操作方法不正確。