一、實訓目標
(1)學會用二甲苯法觀察祛風濕藥對小鼠耳廓腫脹影響的實驗方法。
(2)了解秦艽的抗炎作用原理。
二、實訓原理
本實驗采用塗抹二甲苯的方法致小鼠右耳朵腫脹,然後以打孔器衝下左耳和右耳同一部位的圓片,於分析天平上稱重,通過比較兩個耳朵的質量之差即腫脹度的差別觀察秦艽的抗炎作用。
三、主要儀器、試藥及實驗動物
儀器和用具:直徑6mm打孔器、分析天平。
試藥:秦艽醇浸液(1g/mL)、二甲苯、醋酸氫化潑尼鬆25g/mL注射液(用蒸餾水稀釋至2.5g/mL)。
實驗動物:昆明種小白鼠,雄性,體重20~25g,9隻。
四、實訓內容與步驟
小鼠隨機分3組,每組3隻,分別為秦艽醇浸液組、醋酸氫化潑尼鬆注射液組和生理鹽水組,均按體重0.2mL/10g腹腔注射。給藥30min後,於小鼠右耳兩麵塗二甲苯0.1mL/隻致腫,左耳不塗為正常耳,1h後脫頸椎處死小鼠,用6mm打孔器衝下左耳和右耳同一部位的圓片,於分析天平上稱重,右耳質量減去左耳質量為腫脹度。
五、注意事項
(1)小鼠應選用雄性,避免雌性小鼠動情期性激素變化對實驗結果的影響。
(2)每組小鼠在給藥前、致腫、處死的時間應一致。
(3)塗二甲苯時耳的內外側均要塗,且均勻,用打孔器將耳打下時,位置應一樣。
六、考核標準
優秀:能學會實驗方法基本原理,操作熟練,方法正確,結果統計處理正確。
合格:理解實驗方法基本原理,操作正確,結果統計處理正確。
不合格:不理解實驗方法基本原理,操作方法不正確。