一、實訓目標
（1）學會高效液相色譜儀的使用方法。
（2）學會高效液相色譜法在中藥製劑定量分析中的應用。
二、實訓原理
黃芪甲苷屬三萜皂苷類化合物，三萜類化合物具有廣泛的生物活性，重要的有抗腫瘤、抗炎、抗菌、抗病毒及免疫增強活性等。因此，三萜皂苷類常作為含該類成分的中藥製劑質量控製的重要指標之一。
高效液相色譜法是常用的測定中藥製劑中單體皂苷類成分含量的方法。若中藥製劑中所含的三萜皂苷類成分本身具有較強的紫外吸收，如甘草酸、遠誌皂苷等，可用紫外檢測器檢測；大多數的三萜皂苷類成分如人參皂苷、三七皂苷等在紫外區沒有吸收，可利用其末端吸收來定量，但靈敏度相對較低，且幹擾大。
目前蒸發光散射檢測器（ELSD）這一通用型質量檢測器，具有適用廣的特點，可用於無紫外線吸收的三萜皂苷類成分的含量測定。ELSD係統平衡快（大約30min）、基線相對穩定、重現性好、靈敏度高，且通過自然對數擬合，峰麵積值與進樣量之間呈良好的線性關係，因而結果較準確。
三、主要儀器及試藥
儀器：高效液相色譜儀、C18色譜柱。
試藥：黃芪甲苷對照品、乙腈（色譜純）、甲醇、乙醇、正丁醇；玉屏風口服液（市售）。
四、實訓內容與步驟
色譜條件與係統性適用性試驗：十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；乙腈-水(35∶65)為流動相；蒸發光散射檢測器檢測。理論板數按黃芪甲苷峰計算應不低於3000。
對照品溶液製備：取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每1mL含0.4mg黃芪甲苷的溶液，即得。
供試品溶液製備：精密量取本品20mL，用水飽和正丁醇振搖提取5次，每次25mL，合並正丁醇提取液，用氨試液洗滌3次，每次20mL，正丁醇提取液回收至幹，殘渣加甲醇溶解並轉移至10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，離心，取上清液，即得。
測定法：分別精密吸取對照液5μL、20μL及供試液10μL，注入液相色譜儀，測定，用外標二點法計算，即得。
五、注意事項
在高效液相色譜儀的使用過程中應注意係統的平衡及規範操作。
六、考核標準
優秀：能熟練使用高效液相色譜儀，操作規範，方法正確，結果準確。
合格：能使用高效液相色譜儀，操作基本規範，方法正確，會計算結果。
不合格：不會使用高效液相色譜儀，操作方法不正確。