正文 項目二 高效液相色譜儀的使用(2 / 2)

(2)樣品主峰保留時間一般應在2~3個柱體積之後,即6~10min以後,且與雜質峰分離良好,峰形良好,無拖尾分叉現象,滿足標準規定的係統適用性實驗要求,否則的話應按具體情況調節流動相、固定相使之達到要求。

(3)樣品圖譜采集完成後,單擊“STOP”圖標停止,然後進行下一針進樣。

(4)全部進樣完成後,由工作站界麵進入離線係統,進行數據處理。

5.數據處理

在離線係統,打開圖譜文件,選擇待處理圖譜,選擇合適的斜率、峰寬、最小峰麵積等參數,對圖譜進行積分,若參數選擇合適,積分效果滿意,則保存積分方法,用此方法處理所有圖譜並打印。得出所有峰麵積後,按外標法計算供試品的含量。

6.清洗和關機

(1)分析完畢後,先關檢測器,再用經過濾和脫氣的水清洗色譜係統,30min後,換用甲醇-水衝洗20min,最後換用甲醇衝洗30min,每次換液前注意先充泵排氣,然後再用分析流速衝洗。特殊情況應延長衝洗時間,同時衝洗進樣器。

(2)衝洗完畢後,逐步降低流速至零,關泵和工作站。

(3)關閉電源,做好實驗登記。

五、注意事項

(1)色譜柱與進樣器及其出口端與檢測器之間應無死體積連接,以免試樣擴散影響分離。

(2)新柱或被汙染柱用適當溶劑衝洗時,應將其出口端與檢測器斷開,避免汙染。

(3)壓力表無壓力顯示或壓力波動時不能進行分析,應檢查泵中氣泡是否已排除,各連接處有無漏液,排除故障後方能進行操作。

(4)發現記錄基線波動、出現毛刺等現象,首先應檢查檢測器流通池中是否有氣泡或汙染,如不是流通池引起,可等待氘燈穩定,同時檢查儀器的接地是否良好,必要時,換上新的氘燈,儀器穩定後方能進行操作。

(5)化學鍵合相的穩定性受流動相pH的影響,使用時,應詳細閱讀該柱的說明書,在規定的pH範圍內選用流動相。

(6)色譜流路係統,從泵、進樣器、色譜柱,到檢測器、流通池、在分析完畢後,均應充分衝洗,特別是用過含鹽流動相的,更應注意。如發現泵漏液等較嚴重情況,應請有經驗的維修人員進行檢查、維修。

六、考核標準

優秀:能準確、熟練地完成操作環節,不出現差錯,操作總體正確率在90%以上。口試中能準確回答問題,思路清晰。筆試和回答問題準確率高。總體答對率在90%以上。

合格:出現少量差錯、在老師的提醒下能完成現場操作,操作正確率在60%以上。口試中能較準確回答問題,思路較清晰。筆試和回答問題準確率尚可。總體答對率在60%以上。

不合格:達不到合格的要求。