聽了荊軻的解釋，嬴政看了看鎮定自若的荊軻，又看了看渾身哆嗦不止的秦舞陽，若有所思地說：荊車引你拿著秦舞陽手中的督亢地圖上殿吧。
荊軻從秦舞陽手中接過督亢地圖，步履沉穩地走上了秦廷，在與秦王零距離接觸時緩緩展開了督亢地圖。這幅地圖是一副卷軸，需要一點一點地展開。當完全展開地圖之時，藏在卷軸中心的匕首突然露了出來。
正在興致勃勃地看地圖的秦王見到匕首大吃一驚，但是，此時的荊軻左手已經緊緊地抓住了秦王右邊的袖子，右手也一下子握住了劇毒的匕首，向著秦王的胸膛直刺過去。
荊軻手持的徐夫人匕首是當時最知名的“品牌”匕首，是太子丹花重金買到的，這把匕首在鍛造時被放在劇毒的藥水中多次淬火！因此，毒性已滲入匕首，隻要用它劃破秦王嬴政的皮膚，即可見血封喉，置其於死地。
慌亂之中的秦王嬴政本能地拚命掙脫。結果用力過猛，被荊軻左手緊緊攥住的衣袖竟然從肩部撕扯開來。袖子撕開之時，也就是秦王掙脫之際。掙脫了荊軻的秦王立即拔腿就跑。荊軻一看秦王袖子斷了，人跑了，馬上追上前去。一場刺客與秦王之間的百米競賽竟然在偌大的秦廷之上開演了。
惶恐之中的秦王一邊繞著大殿的柱子轉圈兒，以躲避荊軻；一邊想拔出腰間的長劍，以對付荊軻。但是，劍身太長，秦主從腰間抽劍的空間短於劍身，因此，秦王怎麼也拔不出劍來。據唐人注釋，秦王的佩劍，長約七尺。秦代一尺相當於今天的23.1厘米，故七尺長劍當為今天的1.62米，所以，慌亂中的秦王怎麼也拔不出劍來。
這種危急的場麵秦朝的大臣從來沒有遇見過，慌亂之中均不知所措。按照秦法，大臣上殿不得攜帶任何兵器，台階下的武士沒有命令也不能持兵器上殿，這就造成秦主在前拚命逃跑、荊軻在後死追不舍的緊張場麵。
大臣們隻能徒手阻攔荊軻，這對手持劇毒匕首的荊軻並沒有什麼威脅。在這千鈞一發之際，身背藥囊上朝的禦醫夏無且，突然解下身上的藥囊，衝著荊軻用力砸了過去。荊軻遠遠看見一件東西向它飛了過來，也不知道是什麼，但是，為了自己的安全，不得不為避開這一不明之物放緩了腳步（是時侍醫夏無且以其所奉藥囊提荊軻也），這給了秦王數秒鍾的喘息之機。
愣在一旁的大臣這時也看出了問題的症結所在，齊聲大呼：“王負劍！王負劍！”這種眾人齊呼的場景，真像百米跑道兩邊的拉拉隊一樣，整齊有力。所謂“王負劍”，就是讓秦王把長劍推到背後去。這樣、劍柄向下，劍鋒向上，秦王就可以從下部朝上向前抽劍，便會有足夠的空間讓秦王順利地拔出長劍。
一旦秦王拔出長劍，手持短小匕首的荊軻就完全處於劣勢了一。因此，荊軻尚未接近秦王，秦王的長劍就砍傷了荊軻的左腿，荊軻一下子癱倒在地。受傷的荊軻孤注一擲，奮力將匕首投向秦王，結果沒有擊中，隻擊中了他旁邊的柱子。又怒又驚的秦王上前連刺荊軻八劍。荊軻此時知道大勢已去，倚著柱子，放聲大笑；用最能侮辱人的方式，叉開雙腿（由於古代中國衣服的形製，又開雙腿，即意味著“走光”，對對方是最大的侮辱），大罵秦王（柯自知事不就，倚柱而笑，箕倨以罵）：“今天之所以讓你小子保全小命，完全是因為我想劫持個活人，逼你立個契約，以回報太子。”（事所以不成者，以欲生劫之，必得約契以報太子也）
秦王左右的人此時也一擁而上，殺死了已經身受重傷的荊軻。