（3）一次煆燒稱一定量分離殼膜後蛋殼粉，置馬福爐內高溫煆燒，得白色CaO的蛋殼灰分。
（4）加酸溶解加入一定濃度的稀鹽酸，使蛋殼灰分溶解、過濾、除去酸不溶物，濾液加入一定濃度的Na2CO3溶液，使之完全生成CaCO3沉澱，離心分離，洗滌，除去水溶性鹽類。
（5）二次煆燒將高純度CaCO3於110℃的烘箱內幹燥，轉入馬福爐內高溫煆燒，得高純度灰分CaO。
（6）中和反應將蛋殼灰分研細加入一定量的水，製成石灰乳，在不斷攪拌下緩慢加入有機酸溶液，繼續攪拌至溶液澄清，靜置，過濾。濾液經適當濃縮後，低溫放置自然結晶。
（7）分離提純自然結晶後，溶解，過濾，母液經適當濃縮後多次放置自然結晶，收集合並結晶，用冷蒸餾水洗滌，適當濃縮，然後在幹燥箱中120℃下烘幹脫水，得白色粉末狀無水有機鈣產品。
（二）有機酸鈣的質量標準與檢驗方法
利用蛋殼製取的有機酸鈣主要有丙酸鈣、丙酮酸鈣、檸檬酸鈣、乳酸鈣、蘋果酸鈣、醋酸鈣等，國家已有的質量標準：GB 6225—1986《食品添加劑丙酸鈣》；作為營養添加劑的檸檬酸鈣GB 17203—1998《食品添加劑 檸檬酸鈣》；丙酮酸鈣企業標準CAS：52009-14-0；乳酸鈣執行《中國藥典》2005年版第二部第350頁；蘋果酸鈣可參考GB 13737—1992《食品添加劑L-蘋果酸》；醋酸鈣標準參看《中國藥典》2005年版第二部附錄ⅩⅤ。
三、蛋殼中提取溶菌酶
溶菌酶又稱胞壁質酶或N-乙酰胞壁質聚糖水解酶，它廣泛存在於鳥類和家禽的蛋清，哺乳動物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁、白細胞和組織（如肝、腎）細胞內，其中以蛋清含量最豐富。
溶菌酶是一種具有殺菌作用的天然抗感染物質，廣泛用於醫學臨床。它的主要功能是水解細菌細胞壁，在細胞內則對吞噬後的病原菌起破壞作用，所以它具有抗菌、抗病毒、抗炎症、促進組織修複作用。另外溶菌酶與抗菌素具有良好的協同增效作用，臨床上用於五官科疾病等。
近年來隨著食品業的發展，溶菌酶用於食品保鮮的研究取得了較好的效果，它對雙歧杆菌的生長具有一定的促進作用，用於部分食品的添加劑。
（一）溶菌酶的化學組成和性質
溶菌酶是一種堿性氨基酸，酰胺殘基及芳香族氨基酸，如色氨酸的比例很高。雞蛋清溶菌酶是由129個氨基酸組成的單一肽鏈，分子質量為14388u，分子內有四對雙硫鍵，分子呈扁長橢圓球體。溶菌酶的活性中心是天冬氨酸52和穀氨酸35，它能水解黏多糖或甲殼素中的N-乙酰氨基葡萄糖之間的β-1，4-糖苷鍵，從而溶解細菌細胞壁。
溶菌酶是一種罕見的穩定蛋白質。在中等溫度的稀鹽溶液中，當pH為1.2～1.3時仍未見構象改變。在中性pH稀鹽中，它的躍遷溫度是77℃，在pH為5.5，50℃加熱4h後，酶變得更活潑。但在pH1.0～3.0時，其躍遷溫度下降至45℃。低溫度的Mn（1mol/L）在中性和堿性條件下能使酶免受熱的失活作用。
溶菌酶的最適pH為6.6，等電點pI為4.6。
（二）蛋殼提取溶菌酶加工工藝
1.工藝流程
2.工藝要點
（1）抽提取新鮮的或冰凍的帶有殘留蛋清的蛋殼膜或黏殼蛋的蛋殼，用水衝幹淨後敲碎，放入提取鍋中，按蛋殼量加入3/4的10g/L NaCl溶液。攪拌均勻，用1∶10HCl調節pH至6.0，繼續攪拌，加熱到40℃左右，提取30～40min，調pH至6.0。抽提完畢後用尼龍紗網過濾，收集濾液備用，濾渣再加1/2量的10g/L NaCl溶液抽提一次，合並兩次濾液，濾渣可放入下批再抽提。
（2）除雜蛋白將提取液用20%～30%醋酸調pH4.6，在沸水中迅速加熱到75～80℃，促使卵蛋白在等電點沉澱，用冷水速冷至室溫，沉澱10min左右，然後用尼龍布吊濾，除去雜蛋白，收集濾液。
（3）聚丙烯酸凝集把濾液用0.2g/mL NaOH溶液調節pH至6.0左右，攪拌下滴加10%的聚丙烯酸（用量為濾液的1/4），當凝聚物產生後，溶液的pH為3.0左右。靜置15～30min，凝聚物黏附於容器底部，傾去上層清液。
（4）凝聚物解離、過濾在盛有凝聚物的容器中，加入少量蒸餾水（10kg的蛋殼應加60mL蒸餾水），攪拌下滴加少量純堿，使凝聚物溶解，調節pH至4.0左右，然後滴加0.5g/mL CaCl2溶液，使溶菌酶離解，用布吊濾，分出沉澱（可用H2SO4處理後，除去CaSO4，回收聚丙烯酸），收集濾液。
（5）結晶在上述濾液中，滴加0.2g/mL NaOH溶液至pH為9.5，靜置4～6h，用尼龍布過濾，分出清液，再加NaCl至濃度達5%，靜置3～4h，產生粗結晶。
（6）再結晶粗結晶用pH4.6的醋酸溶解，過濾後分出不溶物，靜置再結晶，幹燥後即得產品。每千克蛋殼可提取再結晶溶菌酶約1g。
（三）注意事項
①選取新鮮的蛋殼作原料，如能把新鮮蛋殼在冷庫中存放幾天再抽提，可提高酶的收率與純度。用鴨蛋殼作原料提取率僅為雞蛋殼的60%。
②原料要清潔純淨，不要混入蛋黃和其他雜質，以防影響收率和樹脂的吸附力。提取要在低溫下進行（10℃以下），防止原料變質和酶失去活性。
③溶菌酶的等電點pH4.6，在酸性條件下較耐熱，提取中選擇pH至4.6，可促使80%以上的蛋白質沉澱，同時可提高酶的活力3～5倍。
④724樹脂用過一定時間後，一定要徹底再生，轉型處理，以提高樹脂的吸收。轉為鈉型後再用0.15mol／L、pH6.5的磷酸鹽緩衝液平衡過夜，平衡液的pH要保持在6.5，否則用NaOH溶液調整，用過的樹脂可以用濃NaOH溶液及濃HCl直接浸泡，再生和轉型後，再用緩衝液平衡。