（2）裝袋培養基配好後，應立即進行裝瓶或裝袋。用12cm×25cm的聚丙烯折角袋或500mL罐頭瓶。裝瓶時木屑培養基裝到瓶肩，要上下鬆緊一致，用粗2cm的尖木棒在料中央打一孔穴，瓶口內外擦淨，罐頭瓶用聚丙烯膜封口。裝袋要求鬆緊適度，切不可裝得過鬆，培養料需緊貼袋壁。
（3）滅菌將料袋或瓶裝入高壓鍋或土蒸灶裏進行滅菌。裝鍋時，分層排列，滅菌袋（瓶）不能互相擠壓，留有一定的空隙，擺滿一層後，上層的擺放方法同第一層。采用常壓蒸汽滅菌時要注意先用旺火猛燒，在最短的時間內將鍋燒開，達到100℃後維持10～12h，再悶一夜第二天早晨出鍋，要求攻頭、控中、保尾，確保滅菌徹底。
4.3.2棉籽殼培養基的製作
棉籽殼不易吸濕，最好采用機械拌料，經過機械攪拌、混合、擠壓，濕潤較快。而用手工拌料，應將棉籽殼預濕，使其充分吸水。其他步驟與木屑培養基配製相同。
4.3.3草腐生菌類原種培養基的製作
糞草菌種是以糞、草為主要原料製備的菌種。糞草可以發酵，也可不經發酵。它是蘑菇、草菇等菇類常用的菌種類型。配製方法同木腐生菌類。其建堆方法與雙孢蘑菇培養料的前發酵相似，可參閱進行。
（1）分裝培養基配製後，悶1～2h（夏季時間不宜過長），待培養料充分吸水後裝料，裝至瓶肩處，培養料做到上緊下鬆，擦幹淨瓶口內外側，打1.5cm粗接種孔至瓶底，用雙層封口膜封口，並在內層封口膜中央剪邊長1.5cm菱形口。大規模生產時，將大量菌種瓶密集豎放於地麵，一人用鐵鏟將培養料撒在瓶口麵上，另一人用木板或掃帚來回地刮、掃，隨後即可開始單瓶分裝封口。料瓶可用棉塞封口；聚丙烯塑料袋裝料時可用手工或裝袋機裝，用繩係緊。
（2）滅菌多用高壓蒸汽滅菌法滅菌：將料袋或瓶裝入高壓鍋內，分層排列，滅菌袋（瓶）不能互相擠壓，留有一定的空隙，擺滿一層後，上層的擺放方法同第一層；裝好鍋升溫，高壓滅菌壓力為0.15MPa，1.5～2h。采用常壓蒸汽滅菌：開始加熱升溫時，火要旺要猛，從生火到鍋內溫度達到100℃的時間最好不超過5h，否則一些雜菌就會迅速繁殖，從而使養分受到破壞，影響培養料的品質，也易使滅菌不徹底；當溫度到100℃時，從排氣管排出冷氣，再開鍋時開始計時，保持10～12h，鍋內要經常補加熱水，以防燒幹鍋；中間不能降溫，最後用旺火猛攻一會兒，然後停止加熱，再利用餘熱悶閉10h再出鍋。出鍋用的塑料筐要噴灑2％的來蘇兒水等消毒。把剛出鍋的熱料袋運到消過毒的冷卻室裏或接種室內冷卻，待料袋溫度降到28℃以下時才能接種。
（3）接種、培養方法與穀類培養基相同。
4.3.4枝條原種的製作
通常選取1～2年生、粗1cm的闊葉樹枝條，如桑樹、柞樹、果樹修剪下來的枝條，伐下後，將枝條破成兩瓣，然後把它砍成一頭尖一頭平、長8～9cm的短條，曬幹或烘幹備用。也可選用方便筷子。
（1）配方主料：方便筷子80雙/袋；鋪料：木屑78％，麩皮(或米糠)20％，石膏粉1％，蔗糖1％，含水量60％。
（2）配製將方便筷子掰開浸於含蔗糖1%、磷酸二氫鉀0.1%，pH為8的營養液中，壓緊、防止上浮，浸泡24h撈出備用。並將鋪料按配方比例配好攪拌均勻。
（3）裝袋將處理好的筷子裝進17cm×33cm的折角袋中，每袋裝筷子80雙，再將拌好的營養料均勻地填充在筷子中間周圍的縫隙中，使筷子上下周圍充分接觸到營養料，裝料高度以沒過筷子為宜，然後紮緊袋口。
（4）滅菌高壓滅菌在0.15MPa壓力下滅菌2h左右。常壓滅菌時將料袋均勻地豎立擺放於滅菌鍋內，封鍋後，急火加熱，待鍋內溫度升到100℃時，開始計時，持續10h左右，滅菌時做到“攻頭、促尾、保中間”，保證鍋內水分充足。
（5）接種培養料溫降到20℃左右時，按常規接種、培養。由於枝條培養基的通透性好，在23～25℃下培養，菌絲生長迅速，要注意通風換氣，發菌中後期堆溫和室溫不超過23℃，25d左右即可長滿袋，再將室溫降到10℃左右複壯7d。
枝條菌種由於表麵積大，菌絲除了生長在枝條表麵外，還可長入枝條內，攜帶的菌絲量大，在轉接時無疑就增大了接種量。在轉接木屑、穀殼類培養基時，隻需將一根枝條插入培養基中間即可，操作方便簡單，有利於減輕汙染，增加接種成功率。接種後，菌種從上、中、下多點萌發，菌絲從裏向外蔓延，滿瓶（袋）時間一般可提早5～7d。
【複習思考題】
1.簡述原種的製作流程。
2.簡述原種培養基的滅菌方法及要求。
3.簡述原種的接種過程。
4.製訂原種的生產計劃。
【操作與實踐】
獨立完成原種製作，詳細記錄操作過程和結果。