如果接種室較大，最好多放幾個容器，進行多點熏蒸，效果會更好。有條件的安裝紫外線殺菌燈，在熏蒸的同時開啟紫外燈，可達到更好的殺菌效果。
甲醛氣體對人的皮膚和黏膜組織有刺激損害作用，操作後應迅速離開消毒現場。熏蒸後，24h後方能進入室內工作。若氣味過濃影響操作時，可在室內熏蒸或噴霧濃度為25％～28％的氨水，每立方米空間用38mL，作用10～30min，以除去甲醛餘氣。
3.2.2.2硫磺
常用於無金屬架的培養室、接種箱、接種室等密閉空間的熏蒸消毒。硫磺用量為15～20g/m3。使用方法為先加熱，使室內溫度升高到25℃以上，同時在室內牆壁或地麵噴水，使空間相對濕度在90%以上。在磁盤內放入少量木屑，再放入稱好的硫磺，點燃，密閉熏蒸24h後方可使用。由於二氧化硫比較重，因此焚燒硫磺的容器最好放在較高的地方。
3.2.2.3氣霧消毒盒（劑）熏蒸法
近年來，因氣霧消毒劑具有使用方便、擴散力及滲透性強、殺菌效果好、對人體刺激性小等優點，而被廣泛用於室內的空間消毒。一般用量為2～6g/m3，熏蒸30min即可進行接種。使用時取一個大口容器（玻璃、搪瓷、陶器均可），放入適量氣霧劑，點燃後立即會產生煙霧。
3.2.3其他消毒法
4消毒效果的檢查
4.1培養基質消毒效果的檢查
每采用一種新的培養基，或使用一種新的消毒設備，以及變更消毒的壓力和時間，都必須進行消毒效果的檢驗。具體方法是：把消毒後的培養基按消毒鍋內的不同位置，每處抽取數管（瓶），標上記號，置25～30℃培養一周左右進行空白培養。如培養基表麵和內部無任何變化則說明消毒效果較好，可直接使用。如果某一位置的培養基出現了雜菌菌落，可能是擺放的太緊，導致蒸汽不暢，或鍋的結構不合理等原因所致，應根據上述情況進行改進；如果大部分或全部菌種瓶都出現雜菌，說明消毒溫度或消毒時間不夠，應提高壓力或延長消毒時間。經過幾次檢驗都證明能徹底消毒後，以後按同樣條件消毒的則不必進行檢查。
4.2空間消毒效果的檢驗
無菌室、菌種培養室、接種箱及栽培房等場所目前均采用化學滅菌，通常是噴灑或熏蒸。場所消毒後最好對消毒效果進行檢驗，以便了解消毒效果，提高接種成品率，如有問題則應分析原因，加以改正。
4.2.1檢查方法
常用的檢查方法有平板法和斜麵法兩種。
（1）平板檢驗法用培養食用菌的常規PDA培養基或肉湯瓊脂培養基做成平板數個，滅菌後放入待測試的消毒場所。檢驗時，按無菌操作各將其中一個平板的蓋子打開，經過15min、20min、30min後，再蓋好，另設1～2個不開蓋作對照；然後放在30℃下培養48h，檢驗有無雜菌生長。
（２）斜麵檢驗法將以上的常規培養基斜麵各取兩管，放入消毒場所。按無菌操作各將其中一管棉塞打開，把棉塞放入滅菌的培養皿內，經30min後，將棉塞通過火焰塞回試管，連同對照試管一起在30℃下培養48h，檢驗有無菌落生長。
檢驗用的平板培養基或試管斜麵培養基經培養後，根據是否長有菌落以及菌落的數量，判斷滅菌與消毒是否徹底，按奧格梁斯基法計算每立方米空間所含雜菌量。
通過計算得出空間存在的雜菌數。一般要求平板培養基開蓋30min，菌落不超過5個為合格；斜麵培養基開塞30min，以不出現菌落為合格。如達不到要求，還須根據雜菌菌落形態判斷雜菌類別，以便采取相應措施，提高滅菌效果。
4.2.2檢驗內容
4.2.2.1空氣熏蒸效果檢驗
接種室(箱)用福爾馬林或其他藥劑熏蒸後，在開始使用前半小時打開培養皿(或試管棉塞)，至使用時蓋(塞)好。
4.2.2.2紫外線燈消毒效果檢驗
紫外線消毒效果的檢驗可分為兩個方麵：一是對紫外線強度的檢驗；二是對消毒環境的檢驗。
（1）紫外線強度的檢驗紫外線強度的檢驗可用碘化鉀法。原理是紫外線可將碘離子氧化成碘，碘與澱粉變色呈藍色。將浸有澱粉和碘化鉀溶液的試紙置於紫外燈下照射，根據顏色變化的深淺判斷紫外線的強弱。
（2）紫外線對空氣消毒效果檢驗接種室、接種箱用紫外線照射後，分別在不同位置和不同高度放置平板培養基。按平板檢驗法檢驗空氣中的雜菌，以判斷紫外線的消毒效果。效果不好時，應調整紫外線的高度或延長照射時間，或更換燈管。
4.2.2.3操作過程中空氣汙染情況檢驗
為了檢驗在使用接種室過程中，由於人員進出、器材搬放、操作動作等原因造成的空氣汙染，可在準備工作結束後、接種操作開始時打開蓋子，經過5min、30min或直到工作結束時再蓋好，以檢驗在不同使用時間內空氣的汙染程度。
5影響消毒劑作用的因素
不同的消毒劑其殺菌或抑菌不同。有的能使雜菌的蛋白質變性，有的可與雜菌的酶係統相結合而影響其代謝，有的則能降低細菌的表麵張力，增加菌體細胞膜的通透性，使細胞破裂或溶解。影響消毒劑上述作用的主要因素有以下幾種。
５.１環境條件的影響
消毒劑作用的溫度和時間，對殺菌力的影響最為顯著。一般講，溫度越高，殺菌效果越好；作用的時間越長，殺菌效果越好。
此外，環境中如果存在著蛋白質等有機物，由於化學消毒劑與蛋白質的結合而引起消耗，而大大減弱消毒劑的效果。
５.２消毒劑的性質與濃度
消毒劑的化學性質決定其殺菌力，它必須溶解於水，方可滲入微生物體內而發揮作用。如升汞在水中解離度大，因而殺菌力也大。
消毒劑的濃度也直接影響它的殺菌力，一般消毒劑的濃度越大，其殺菌力越強。但石炭酸和酒精濃度過高，反而不能達到殺菌的目的。
５.３微生物的種類
不同微生物對各種消毒劑的敏感度不同，這主要是與其細胞的結構有關。因此，某一種化學消毒劑，對某一種微生物的消毒力，必須分別加以衡量，以便對症下藥。如細菌的芽孢，對同一或不同化學藥品的抵抗力，比其營養體大得多。所以，要達到徹底消毒的目的，切勿濫用化學消毒劑。
【複習思考題】
1.舉例說明什麼是消毒、滅菌和除菌?
2.高壓蒸汽消毒成敗關鍵是什麼?
3.紫外線消毒應注意哪些問題?
4.常用的化學消毒劑有哪些？它們在食用菌生產中如何使用？