二、實驗材料
1．菌種
青色鏈黴菌。
2．培養基
高氏1號培養基。
3.儀器
培養皿、載玻片、蓋玻片、無菌滴管、鑷子、接種環、小刀(或刀片)、水浴鍋、顯微鏡、超淨工作台、恒溫培養箱。
三、實驗原理
放線菌一般由分枝狀菌絲組成，大多數放線菌的菌絲分化為基內菌絲(營養菌絲)和氣生菌絲兩部分，基內菌絲深入培養基中生長，氣生菌絲則生長在培養基表麵，並向空中伸展，因此用普通方法製片，很難整體觀察到放線菌的形態，須采用適當的培養方法，以便將自然生長狀態的放線菌直接置於顯微鏡下觀察。通常采用的方法有插片法、壓印法、埋片法。
四、操作方法
（一）插片法
1．倒平板
將高氏1號培養基熔化後，倒10～12mL於滅菌培養皿內，凝固待用。
2.插片
將滅菌的蓋玻片以45°角插入培養皿內的培養基中，插入深約為1/2。
3.接種與培養
用接種環將菌種接種在蓋玻片與瓊脂相接的沿線，放置28℃培養3～7d。
4．觀察
培養後菌絲體生長在培養基及蓋玻片上，小心用鑷子將蓋玻片抽出，輕輕擦去生長較差一麵的菌絲體，再將蓋玻片上長有良好菌絲體的一麵置於載玻片上，壓好，在顯微鏡下觀察。
（二）壓印法
1．製備平板
在凝固的高氏1號培養基平板上用劃線分離法得到單一的放線菌菌落。
2．挑取菌落
用滅菌的小刀(或刀片)挑取有單一菌落的培養基一小塊，放在潔淨的片上。
3．加蓋玻片
用鑷子取一潔淨蓋玻片，在火餡上稍微加熱，然後把玻片蓋放在帶菌落的培養基小塊上，再用小鑷子輕輕壓幾下，使菌落的部分菌絲體印壓在蓋玻片上。
4．觀察
將印壓好的蓋玻片放在潔淨的載玻片上(菌體朝向載玻片)，然後放置在顯微鏡下觀察孢子絲和孢子。
（三）埋片法
1．倒瓊脂平皿
將已配製、滅菌的高氏1號瓊脂培養基熔化，通過無菌操作倒入滅菌的培養皿中，倒入的培養皿約15mL。
2．接種與培養
在已凝固的瓊脂平板上用滅菌小刀切開兩條小槽，寬度小於1.5cm。把放線菌接種在小槽邊上，蓋上已滅菌的蓋玻片1～2片，蓋好培養皿蓋。將製作好的平板放在28℃恒溫箱培養3～4d。
3.觀察
取出培養皿，可以打開皿蓋，將培養皿直接置於顯微鏡下觀察；也可以取下蓋玻片，將其放在潔淨載玻片上，置顯微鏡下觀察。
五、實驗結果與報告
(1)繪圖說明你所觀察到的放線菌的基本形態。
(2)比較3種培養和觀察放線菌方法的優缺點。