第一章 血液的常規檢驗及應用(1 / 3)

(一)白細胞計數、分群檢測原理

從電阻抗的原理可看出,不同體積的白細胞通過小孔時產生的脈衝大小不同,而不同類型的白細胞(如淋巴細胞、單核細胞、嗜中性粒細胞)經溶血劑作用後有明顯的差異,因此根據脈衝的大小,即可人為地將血內的白細胞分成幾群(二分群或三分群)。目前,在臨床應用中,稱之為“二分類”“三分類”血液分析儀的概念是不確切的。因為白細胞分類是指在顯微鏡下,觀察經染色的血塗片,根據細胞形態(包括細胞胞體大小;胞漿的顏色及量的多少;胞漿中顆粒的顏色、大小及數量;核的形狀及染色質的特點)綜合分析,得出準確均一的細胞群。而電阻抗法白細胞“分類”實際上是根據溶血劑作用後的白細胞體積大小的分群,其測量的標準隻是根據白細胞體積的大小,而體積大小並不是細胞形態唯一的指標。比如,經溶血劑作用後有些嗜堿細胞可落入小細胞群,而大淋巴細胞可落到“中間”或“大細胞群”。顯微鏡下,單核細胞較粒細胞體積大,而經溶血劑作用後,粒細胞體積大於單核細胞。因此,在解釋血液分析儀白細胞“分類”的結果時,“淋巴”細胞在儀器分類時隻認定為體積與淋巴細胞體積相似的小細胞群,在這群體中,可能90%的白細胞是淋巴細胞,而絕不是均一細胞群體。這種差異在病理情況下更大,這也就是專家們反複強調電阻抗法白細胞“分類”不能代替顯微鏡塗片檢查之原因。

目前,很多儀器除給出細胞數據結果外,同時提供出細胞體積分布圖形,這些表示出細胞群體分布情況的圖形稱為直方圖(histogram)。它可顯示出某一特定細胞群的平均細胞體積、細胞分布情況和是否存在明顯的異常細胞群。直方圖是由測量通過感應區的每個細胞脈衝累積得到,根據庫爾特原理可在計數的同時進行分析測量。以橫坐標為體積,縱坐標為相對數量,血液分析儀在進行血細胞分析時,將每個細胞的脈衝數根據其體積大小分類,並儲存在相應的體積通道中。從每個通道收集的數據統計出細胞的相對數量,表示在“Y”軸上;細胞體積數據以fl為單位,表示在“X”軸上。例如,在進行白細胞體積分析時,儀器的計算機部分可將白細胞體積從一定體積範圍35~450fl分為若幹通道256個通道,每個通道約為1.64fl,不同體積細胞進入相應通道中,從而得到白細胞體積分布的直方圖。不同檔次儀器設置的通道數目不同,直方圖形也不同。電阻抗測定方法得到的白細胞分類數據是根據白細胞體積直方圖計算得來的。經過溶血劑處理後的白細胞,根據體積大小可初步確認其相應的種類:第一亞群是小細胞群(35~90fl)主要是淋巴細胞;第二亞群是中間細胞區(90~160fl),這區域主要是單個核細胞(如單核細胞、幼稚細胞)故稱為單個核細胞,在正常時有單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞,在病理情況下異常淋巴細胞、幼稚細胞、白血病細胞可出現在這個區域;相當於粒細胞大小的細胞位於第三亞群為大細胞群(160fl以上)。儀器根據各細胞群占總體的比例計算出各細胞群的百分比,再與該標本的白細胞總數相乘,即得到各項的絕對值。如標本中有未成熟細胞、異常細胞或非典型細胞,有些三分群的血液分析儀在報告單上可打出報警符號(flags)“R”,並能指出哪一個區域有異常細胞及異常細胞的種類。

(一)白細胞計數、分群檢測原理

從電阻抗的原理可看出,不同體積的白細胞通過小孔時產生的脈衝大小不同,而不同類型的白細胞(如淋巴細胞、單核細胞、嗜中性粒細胞)經溶血劑作用後有明顯的差異,因此根據脈衝的大小,即可人為地將血內的白細胞分成幾群(二分群或三分群)。目前,在臨床應用中,稱之為“二分類”“三分類”血液分析儀的概念是不確切的。因為白細胞分類是指在顯微鏡下,觀察經染色的血塗片,根據細胞形態(包括細胞胞體大小;胞漿的顏色及量的多少;胞漿中顆粒的顏色、大小及數量;核的形狀及染色質的特點)綜合分析,得出準確均一的細胞群。而電阻抗法白細胞“分類”實際上是根據溶血劑作用後的白細胞體積大小的分群,其測量的標準隻是根據白細胞體積的大小,而體積大小並不是細胞形態唯一的指標。比如,經溶血劑作用後有些嗜堿細胞可落入小細胞群,而大淋巴細胞可落到“中間”或“大細胞群”。顯微鏡下,單核細胞較粒細胞體積大,而經溶血劑作用後,粒細胞體積大於單核細胞。因此,在解釋血液分析儀白細胞“分類”的結果時,“淋巴”細胞在儀器分類時隻認定為體積與淋巴細胞體積相似的小細胞群,在這群體中,可能90%的白細胞是淋巴細胞,而絕不是均一細胞群體。這種差異在病理情況下更大,這也就是專家們反複強調電阻抗法白細胞“分類”不能代替顯微鏡塗片檢查之原因。

目前,很多儀器除給出細胞數據結果外,同時提供出細胞體積分布圖形,這些表示出細胞群體分布情況的圖形稱為直方圖(histogram)。它可顯示出某一特定細胞群的平均細胞體積、細胞分布情況和是否存在明顯的異常細胞群。直方圖是由測量通過感應區的每個細胞脈衝累積得到,根據庫爾特原理可在計數的同時進行分析測量。以橫坐標為體積,縱坐標為相對數量,血液分析儀在進行血細胞分析時,將每個細胞的脈衝數根據其體積大小分類,並儲存在相應的體積通道中。從每個通道收集的數據統計出細胞的相對數量,表示在“Y”軸上;細胞體積數據以fl為單位,表示在“X”軸上。例如,在進行白細胞體積分析時,儀器的計算機部分可將白細胞體積從一定體積範圍35~450fl分為若幹通道256個通道,每個通道約為1.64fl,不同體積細胞進入相應通道中,從而得到白細胞體積分布的直方圖。不同檔次儀器設置的通道數目不同,直方圖形也不同。電阻抗測定方法得到的白細胞分類數據是根據白細胞體積直方圖計算得來的。經過溶血劑處理後的白細胞,根據體積大小可初步確認其相應的種類:第一亞群是小細胞群(35~90fl)主要是淋巴細胞;第二亞群是中間細胞區(90~160fl),這區域主要是單個核細胞(如單核細胞、幼稚細胞)故稱為單個核細胞,在正常時有單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞,在病理情況下異常淋巴細胞、幼稚細胞、白血病細胞可出現在這個區域;相當於粒細胞大小的細胞位於第三亞群為大細胞群(160fl以上)。儀器根據各細胞群占總體的比例計算出各細胞群的百分比,再與該標本的白細胞總數相乘,即得到各項的絕對值。如標本中有未成熟細胞、異常細胞或非典型細胞,有些三分群的血液分析儀在報告單上可打出報警符號(flags)“R”,並能指出哪一個區域有異常細胞及異常細胞的種類。