(二)觀察胸腹部皮下組織變化
將動物固定於解剖台上,用紗布蘸取來蘇水濕潤被毛。從下頜至恥骨聯合沿正中線切開皮膚,剝離皮下組織,觀察皮下組織有無出血和感染情況。分離出氣管,用大號止血鉗將氣管夾住,便於剖胸時觀察肺髒。再將胸部皮下組織和胸大肌,自胸部中線起剝離。
(三)腹腔檢查
沿肋骨下緣腹正中切開腹壁肌肉至恥骨聯合(不要用力過猛,以免切破腹腔髒器,特別是膀膀)。從肋骨下端向脊柱方向,將兩側腹壁剪開,以便觀察腹腔內髒器。剖開腹腔時,應注意腹腔內有無積液、血液或炎性滲出物,如有應做記錄。根據實驗需要可做細菌培養;當需詳細尋找其來源時,在尋找時應注意不可將腹腔內髒器翻亂,應有次序地檢查。其次檢查腹腔內各髒器位置是否正常,特別應注意檢查肝、脾的位置及大小、膀胱脹滿程度,胃腸充盈情況,大網膜和腹膜的顏色和狀態等。
(四)胸腔的切開和檢查
檢查腹腔後,再開胸腔。用軟骨刀或剪刀,在肋骨的軟硬骨連結線內側約1cm處,從肋弓到第2肋骨,將左右肋骨切斷,與肋骨軟骨連結處略成平行。這時應注意刀尖勿將肺組織切除,剪時應盡量貼著胸內壁。肋骨切斷後,將肋弓提起,先不要急於剪胸鎖關節,以免損傷大血管,血液入胸腔,誤為胸腔積血。應先以觀察兩側胸腔內是否有積液或血液和炎性滲出液,判斷其性質和量。必要時可做塗片和細菌培養等化驗。繼之,用骨剪自下而上剪斷左右第1肋骨和胸鎖關節,用刀切斷與其相連的軟組織及血管。取下胸骨(附有肋軟骨),暴露胸腔。首先觀察胸腔各髒器位置及彼此相互關係,然後檢查兩肺表麵與胸壁有無粘連,胸膜顏色和狀態,心包情況和縱隔有無出血等變化。
檢查胸骨髓情況:用剪刀將胸骨兩邊的肋軟骨剪去,並將胸骨周圍肌肉剝離幹淨。取第3或第4節胸骨,一端用紗布包住,以左手夾緊,放在手術台上,用刀將胸骨切開,檢查胸骨髓顏色和濕潤程度。
(五)胸腔器官的取出和剖驗
用尖刀自頸部切口插入下頜骨正中的內側緣,沿下頜骨內側緣分別向兩側割離舌及口腔底與下頜骨間的組織聯係。隨後一手用組織鉗自切口伸入口腔內夾住舌尖,並將舌向下拉出口腔,以暴露軟硬齶,另一手執刀,在軟硬齶交界處把軟齶切斷,再將咽後壁切斷。這樣,便將舌、扁桃體、軟齶、咽部等組織與口腔壁及咽壁分離。再將氣管及食管等與周圍組織及脊柱相連係處分離,直達胸腔上口為止。在胸腔入口處切斷鎖骨下動脈及頸總動脈等,將口腔及頸部器官連同心肺一起向下拉,使胸腔器官與脊柱相連的軟組織互相分離,直達橫膈為止。用止血鉗在橫膈的胸腔側夾住主動脈、下腔靜脈及食管。在夾住的上端剪斷,即可將上消化道(舌、扁桃體、咽、食管)、上呼吸道(喉、氣管和支氣管)連同心髒及肺髒一起取出。
1.上消化道先檢查舌黏膜有否出血和潰瘍;咽部有無出血和炎性滲出物;兩側扁桃體表麵有無出血和炎性滲物。然後自上而下剪開食管後壁,檢查黏膜有無出血和泡沫樣、膽汁狀物質。然後,用剪刀自下而上把食管與氣管分離至喉頭,剪去食管。
2.呼吸道先檢查喉頭、聲門周圍黏膜有無出血和水腫。兩側肺表麵有無出血、炎症變化;有無實變和肺氣腫現象。檢查時注意區分各肺葉的變化。然後剪開喉頭後壁,再將氣管膜部剪開氣管、支氣管及其分支,檢查黏膜有無充血、出血、炎症情況,有無泡沫樣炎性滲出液。肺的切麵有無實質病灶、氣腫、萎縮,輕壓時有無內容物自小支氣管內擠出。
3.剪開心包膜暴露出心髒,注意心髒的大小,外形、心外膜情況。依血流方向剖開心髒,先檢查右心,後檢查左心。觀察心肌、心內膜等變化。
(1)右心自下腔靜脈入口處至右心房做直線剖開,從此線中點沿心髒右緣剖至心尖部,從心尖部與心室隔向右距離1cm處沿冠狀動脈溝平行地剖至肺動脈。檢查右心房、右心室內壁肌肉有無出血和感染。右心房內有無血絲蟲。三尖瓣和肺動脈瓣有無病變。
(2)左心自左右肺靜脈入口處將左心房直線剪開,沿心髒左緣剖至心尖部,再從心尖部與心室中隔向左距離1cm處沿冠狀動脈溝,平行地剖開左心室的前壁和主動脈,檢查二尖瓣、主動脈瓣和腱索有無病變,左心房、左心室內壁有無出血和感染。檢查冠狀動脈:自左冠狀動脈口起剪開前降支和旋支,觀察有無硬化和血栓等。檢查右冠狀動脈不應在開口處打開,而應在主動脈根部的右側,在右心室的外膜中,找出其總幹,橫切一刀,然後切開,最後剪至遠側部分和後降支。
動物心髒剖檢方法以箭頭表示:右心房右房室口(三尖瓣)右心室肺動脈口(肺動脈瓣)肺動脈。左心房左房室口(二尖瓣)左心室主動脈口(主動脈瓣)主動脈。
(六)腹腔髒器的取出和剖檢
取出腹腔髒器的一般程序是:首先將脾髒取出,其次取出胃、十二指腸、胰、腸係膜(連同淋巴結)、空腸、回腸、結腸、直腸。然後取出肝、膽,最後取出腎上腺及泌尿生殖器官。
1.脾髒脾位於左側橫隔下和胃底部的後外側。以左手提起脾髒,割斷脾門部血管,取出整個脾髒。檢查其大小、厚薄和硬度,並觀察包膜表麵是否平滑或有否皺紋,然後用刀沿脾的長軸和最凸處對著脾門做一切麵,檢查切麵的變化。正常動物脾的切麵、濾泡、小梁和紅髓清晰可見。濾泡在正常情況下隻在45°的視線下才能見到極細的顆粒;小梁呈灰白色,細條狀;在濾泡和小梁之間是紅髓。正常的紅髓組織略柔軟,如用刀輕刮並不脫落。
2.肝和膽囊剪斷肝十二指腸韌帶和其中的膽總管、門靜脈和肝動脈等。在肝的橫膈麵切斷鐮狀韌帶,並割斷後麵的肝三角韌帶以及肝靜脈和下腔靜脈的連接,然後將肝髒和膽囊取出。注意在分離肝時,不要剪破腎上腺。
檢查膽囊時應先用一有齒鑷夾起膽囊,用剪沿膽囊壁細心地與肝組織分離,然後剖開分離的膽囊,檢查膽囊管是否有阻塞等,記錄膽汁的量和性質,仔細檢查膽汁有無結石和華支睾吸蟲等。最後檢查膽囊有無出血、炎症和膽固醇沉積等病變。
檢查肝的形狀和色澤,有無充血、出血、貧血和脂肪變,檢查肝切麵的色澤,小葉的結構是否整齊清楚,門管區是否擴大,膽管和血管有無擴張。
3.胃腸係統提起夾在食管下端的止血鉗,剪去食管周圍組織,將胃大彎的大網膜和胃小彎的小網膜的連接剪斷,將胃拉向一側。輕輕拉住腸管,將附著的各腸係膜逐步剪去,直至將全部回腸分離為止。
然後將胃、十二指腸、空腸、回腸、結腸、直腸一並取出。取出前在直腸靠肛門處用止血鉗夾住,在止血鉗下端剪斷直腸。再分別剖驗胃及各腸段的病變。檢查胃時,用腸剪由食管下端沿胃大彎向上經胃底剪到賁門。向下經幽門剪到十二指腸。剪開胃後,檢查胃內容物的量和性狀,胃黏膜有否出血和感染壞死灶。檢查各腸段的病變:剪開前先檢查各腸段的長度,各段腸壁的厚度,漿膜壁有否充血、粘連、滲出物或穿孔,腸係膜淋巴結是否腫大、出血等。然後沿腸係膜連接處剪開腸腔。
檢查腸內容物的性狀,有無寄生蟲,腸黏膜有無脫落、水腫、出血、感染和壞死,以及黏膜皺襞的情況。
(七)腎上腺的取出和剖驗
在左側腹後壁分開左腎上腺周圍的脂肪組織,將左腎上方的腎上腺小心分離取出。右側腎上腺在肝和腎之間的腔靜脈旁,並有一部分蓋在肝下麵。由於右側腎髒高於左側,因而與此相應的右側腎上腺的位置也高。
(八)腎髒、輸尿管、膀胱及生殖器官的取出及剖驗
將腎旁的脂肪結締組織分離後將腎提起,分離開輸尿管至膀胱。將腎髒連同輸尿管一起提出腹腔。將睾丸、附睾連同精索經擴大的腹股溝管內口,從陰囊拉到腹腔內並切斷與陰囊相連的睾丸韌帶引帶。用剪自恥骨聯合內側麵逐層剪開盆腔腹膜外的軟組織,把膀胱、前列腺及尿道後部相連的組織剝離,最後將兩腎、輸尿管、睾丸、附睾、精索和膀胱、前列腺一起取出。注意左右要分開,分別進行剖驗。雌性動物應取兩則卵巢、輸卵管、子宮、陰道等。
1.腎髒先檢查左腎,後檢查右腎。以左手墊紗布持腎,右手持刀自腎凸麵對準腎門做一縱切麵。切麵應使腎盂對半剖開,部分腎盂及腎門外還有少許軟組織相連。用有鉤鑷剝離包膜,觀察剝離是否容易,包膜與腎表麵有無粘連。腎表麵有無出血,星狀靜脈是否可見;腎髒大小有無改變。然後檢查皮質與髓質的厚度、有無出血,皮質與髓質間的分界是否清楚、有無變異,腎髒和腎盂有充血、出血、積聚異常內容物等。
2.輸尿管自腎盂切口用尖頭小剪沿輸尿管向膀胱方向剪開,剪至膀胱外膜,檢查輸尿管內壁有無出血。
3.膀胱從尿道後部剪開前列腺和膀胱,注意檢查尿液性狀,有無血尿和血塊、結石,膀胱內壁黏膜有無出血等。剪開睾丸鞘膜,檢查鞘膜及腔內液體後,將睾丸、附睾一起切開,觀察睾丸、附睾有無病變。以鑷子挑起睾丸曲細精管,視能否挑起。雌性動物應檢查卵巢、輸卵管及子宮等有無病變。
(九)腦和脊髓的取出和剖驗
這一檢查一般均在其他髒器檢查完後進行。將動物俯臥,下頜和頸部放於木枕上,用刀從頭頂部正中線切開皮膚(沿顱頂一直至鼻尖),分離皮下組織並向頭兩側拉開,充分暴露頭顱頂部。用刀將附著在頭顱和頸部脊柱骨上的肌肉盡量剝離幹淨。取一弓形鋸在動物靠眼眉部位上方橫鋸一道,然後通過左右顳部向頭後鋸,在枕外隆突部鋸線彙合,注意不要鋸得太深,以免損壞腦組織。當鋸到感覺阻抗力減小時即停止。繼之取鑿塞進眉部鋸線溝內,用力向上撬開顱蓋骨,使頭蓋與硬腦膜分開。取下顱蓋後,硬腦膜已露出大部分,觀察硬腦膜有無充血、出血等異常變化。然後將正中線的矢狀竇剪開,檢查其中有無血栓或靜脈炎等。以後再將硬腦膜剪開。如要檢查脊髓,在剪開硬腦膜前,用骨剪在枕骨大孔將頸部脊椎管剪開4~5cm,並將脊椎管周圍骨組織剪去,暴露頸髓。
取腦、脊髓的方法:先分離出頸部脊髓一段3cm左右長,用刀切斷。取紗布蓋於已暴露的腦組織上,左手輕輕提起頸髓,用小手術刀切斷與頸相連的脊椎動脈和頸神經。將嗅腦切斷,再切斷視神經,用小尖刀探入蝶骨鞍槽內剝離與腦垂體相連的周圍組織,切斷腦神經,最後連同腦垂體將整個腦、脊髓取出。取出腦後,細心檢查腦的表麵,注意腦回和腦溝有無異常變化,然後用腦刀切開觀察。
四、實驗動物屍體的處理方法
(一)原則
實驗後的動物,實驗者須需將之包裝完整並置於冰櫃內。
(二)方法
1.小動物屍體包裝完整後,寫上使用者姓名,單位,日期,置於冰櫃內,並登錄在登記簿上。
2.大中型動物屍體裝於塑膠袋內後,再裝進動物中心提供的紙箱中,然後置放於冰庫,並登記在登記簿上。
3.屍體由動物中心專人負責裝箱後,運送至指定地點集中焚化。
4.感染性實驗需依規定先高壓滅菌後再處理。
5.處理放射線物質的實驗動物,須依輻射防護管理委員會的規定處理。