藏藥沙棘膏HPLC指紋圖譜研究
民族藥
作者：遊佳莉 王毓傑 張藝 楊洋 蘇永文 範剛
[摘要]通過對不同產地藏藥沙棘膏的HPLC指紋圖譜分析，為沙棘膏的品種鑒定和製備工藝的研究奠定基礎。實驗使用AgilentzorbaxSB-C18（4.6mm×250mm，5μm）色譜柱，以乙腈-0.4%磷酸溶液為流動相梯度洗脫，流速1.0mL.min-1，柱溫30℃，檢測波長360nm。建立了15個批次沙棘膏的共有圖譜，提取了7個色譜峰作為指紋圖譜共有峰，結合對照品對其中的3個色譜峰進行了指認，分別為槲皮素、山柰素、異鼠李素；15批藥材中第14批次與對照指紋圖譜比較相似度小於0.9，其他批次的相似度均大於0.9。該研究首次采用HPLC建立藏藥沙棘膏的指紋圖譜，該方法具有良好的精密度、穩定性和重複性，為沙棘膏質量控製和評價提供依據。
[關鍵詞]藏藥；沙棘膏；HPLC；指紋圖譜
沙棘係蒙古族、藏族習用藥材，藏文名為達爾布。《晶珠本草》[1]記載：達爾布除肺腫瘤，化血，治培根病。《如意寶樹》中說：“達爾布治消化不良，肝病”。讓均多吉說：“達爾布膏治肺病”。《圖鑒》中說；“達爾布味酸刺舌。治療肺病”。《衛生部藥品標準（藏藥第一冊）》（1995年版）中記載：沙棘膏（藏文名為“達布坎紮”）為胡頹子科植物沙棘成熟果實的水煎膏，同時收載於《中國藥典》2000年版附錄。具有“清熱止咳，活血化瘀，愈潰瘍”的功效，主治“氣管炎，消化不良，胃潰瘍及閉經”[2-3]等症。現代化學及藥理研究表明，沙棘膏中主要化學成分是黃酮類化合物、維生素C等[4-6]，其中槲皮素、山奈素、異鼠李素為其主要的黃酮類化合物[7-10]，具有止咳平喘、利肺化痰的作用、對慢性咽炎、支氣管炎、咽喉腫痛、哮喘、咳嗽痰多等呼吸道係統疾病均有很好的作用。
1材料
美國Agilent1200高效液相色譜儀（DAD檢測器）；ULUP-I-10T優普超純水機（成都超純科技有限公司）；KQ-50B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；BP121S電子天平（德國Sartorius公司）。
槲皮素對照品（批號MUST-13072505，中國科學院成都生物研究所）；山柰素對照品（批號110861-201209，中國食品藥品檢定研究院）；異鼠李素對照品（批號MUST-12112001，中國科學院成都生物研究所）；乙腈、磷酸為色譜純，水為超純水，其餘試劑均為分析純。
分別於西藏、青海、四川、甘肅各大藏藥廠、藏醫院收集，共計23批。
2方法與結果
2.1色譜條件
色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相乙腈（A）-0.4%磷酸溶液（B），梯度洗脫；流速1.0mL?min-1；柱溫30℃；檢測波長360nm；進樣量10μL。梯度洗脫程序：0～10min，10%～15%A；10～30min，15%～18%A；30～55min，18%～38%A；55～65min，38%～10%A。
2.2對照品溶液的製備
取槲皮素對照品、山柰素對照品和異鼠李素對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每lmL含槲皮素12μg、山柰素2μg和異鼠李素15μg的混合溶液，搖勻，即得。
2.3供試品溶液的製備
取本品1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入80%甲醇40mL，稱定質量，超聲處理（200W，40kHz）30min，取出，放冷，再稱定質量，用80%甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
2.4方法學考察
2.4.1精密度試驗取本品1.0g，精密稱定，按2.3項下方法製備供試品溶液，按2.1項下的色譜條件連續進樣6次，記錄各指紋圖譜。以11號峰異鼠李素為參照峰，7個共有峰的相對保留時間與相對峰麵積的RSD分別為0.020%～0.44%和0.20%～2.4%，說明儀器精密度良好。