1.3 動物 SD大鼠，SPF級，雌性，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司，合格證號SCXK（京）2006-0009。
1.4 儀器 LEXXOS雙能X線骨密度測定儀（DMS公司，法國）；r-911全自動放免計數儀（中國科技大學實業總公司）；日立7160全自動生化儀（日本）；Agilent 7500ce 電感耦合等離子體質譜儀（美國）；Shandon Excelsior ES全自動脫水機（英國）；Shandon Histocentre 3石蠟包埋機（英國）；Shandon Finesse 325切片機（英國）；Shandon Varistain Gemini全自動染色機（英國）；Olympus CX41-DP25顯微鏡及圖像分析係統（日本）。
2 方法
2.1 動物分組及模型製備 SD大鼠，雌性，體重200～220 g，按體重分層隨機分為以下6組：假手術組、模型組、陽性藥補佳樂組（0.15 mg·kg-1）、YYH-C低、中、高劑量組（生藥0.7，1.4，2.8 g·kg-1），每組15～18隻。動物分組後除假手術組外其餘各組均行去卵巢手術，即戊巴比妥鈉40 mg·kg-1麻醉後，下腹部75%乙醇棉球消毒後剪開皮膚，分離筋膜、肌肉等，暴露卵巢並摘除，假手術組僅暴露卵巢但不進行切除，術後縫合肌層和皮膚，放回籠中，注意保暖。術後第3天各組動物均開始灌胃給藥，給藥體積10 mL·kg-1，假手術組和模型組給予等體積蒸餾水，每日1次，連續給藥3個月。
2.2 血清生化指標的測定 於末次給藥後禁食16～18 h，0.8%戊巴比妥鈉40 mg·kg-1麻醉，腹主動脈取血，3 000 r·min-1離心20 min製備血清，放射免疫法測定甲狀旁腺激素（PTH）、I型前膠原N末端前肽（PINP）含量；全自動生化分析儀測定堿性磷酸酶（ALP）、鈣（Ca）、磷（P）含量。
2.3 骨計量學指標的測定 取左側股骨和腰椎，骨密度測定儀進行骨密度檢測後，置烤箱中60 ℃過夜，電子分析天平稱其幹重。再置幹燥的器皿內在馬氏爐中800 ℃煆燒6 h，關爐，待其冷卻後，電子分析天平稱其質量得灰重，計算灰重/幹重百分比=灰重/幹重×100%。取此骨灰用原子發射光譜法進行骨鈣磷含量的測定。
2.4 骨組織形態學觀察 取右側股骨，脫鈣後切片行HE染色，采集鏡下組織圖像（放大倍數分別為40倍和100倍），使用MiE顯微圖像分析軟件對組織圖片進行圖像分析。每隻鼠觀察HE染色切片各1張，包括股骨的骨幹和幹骺端組織各1塊，骨幹的參數測量取低倍視野（40倍）；幹骺端的參數測量取高倍視野（100倍），測定區域限定在距骺板下1 cm外的幹骺端，每個標本測定麵積為16 mm2，所有參數均參照Wronski和Malluche的標準[7-8]。
骨組織形態學觀察參數有：①皮質骨麵積百分比=皮質骨麵積/皮質骨及骨髓腔麵積×100%；②骨小梁平均厚度（μm）；③骨小梁麵積（mm2）；④骨小梁體積（即骨小梁麵積百分比）=骨小梁麵積/髓腔及骨小梁麵積×100%；⑤骨形成參數：骨小梁表麵成骨細胞數即每平方毫米骨小梁表麵成骨細胞數；⑥骨吸收參數：骨小梁表麵破骨細胞數即每平方毫米骨小梁表麵破骨細胞數。
2.5 統計方法 各組計量數據均以±s表示，SPSS 13.0統計軟件ANOVA程序進行組間比較。
3 結果
3.1 YYH-C對去卵巢大鼠血清生化指標的影響 動物經去卵巢手術後3個月，與假手術組比較，模型組動物PTH，ALP水平明顯升高（P[3]。PTH是刺激骨吸收的主要激素，絕經後由於甲狀旁腺功能亢進，使骨骼對PTH的敏感性增強，導致骨吸收增加。PINP是目前公認的骨形成的指標，有研究表明，有活性甲狀旁腺激素片段灌注後16 h，發現血中PINP降低，說明PTH片段抑製骨細胞合成I型膠原[9]。血清中ALP的活性是常用的評價骨形成、骨轉換的指標，一般認為ALP的升高是伴隨著骨吸收亢進而出現的代償性骨形成增強引起的。本實驗中，雌性大鼠行卵巢切除術後，PTH顯著升高、PINP顯著下降，而ALP活性明顯增強，說明骨代謝活躍，骨轉換增強，最終造成骨吸收大於骨形成，導致骨質疏鬆症的發生。YYH-C 3個劑量組均能明顯對抗PINP的降低，低、中劑量組尚能明顯抑製PTH的升高，而對ALP的代償性增高無明顯抑製作用，提示YYH-C能明顯抑製骨吸收，改善去卵巢大鼠骨組織的高轉化狀態。