2 方法
2.1 造模與給藥
采用先造模後給藥。先造模8周,第9周起給藥,連續給藥8周。大鼠適應性喂養1周後,除正常對照組(10隻)外,造模大鼠遊泳8周,每周5 d,每天1次,日遊泳時間由10 min逐日增加至第7周末180 min,水深60 cm,水溫30 ℃。製備無人為直接幹預機體生理過程的陰虛內熱證模型。
遊泳8周後,觀察到模型大鼠的體重和抓力明顯下降、麵溫和痛閾敏感性明顯升高,出現了陰虛的症狀,說明造模成功。造模成功率為88.89%,死亡率為7.78%。之後,大鼠隨機分5組:正常對照組(NC)、模型對照組(MC)、陽性對照組(六味地黃丸,PC,2.5 g·kg-1)、黃精水提物低、高劑量組(HJ,2.5,10 g·kg-1),每組10隻,雌雄各半。除對照組外,其餘4組持續遊泳造模,每周5 d,每天1次,每次180 min,受試藥組分別給予黃精水提物2.5,10 g·kg-1,模型組及對照組給等容量蒸餾水,陽性對照組給予六味地黃丸2.5 g·kg-1,灌胃給藥容量為10 mL·kg-1,每天1次,連續8周。
2.2 測定指標
體重:每3 d稱量1次,觀察大鼠體重趨勢。麵溫:每2周測定1次,將紅外測溫計測試孔緊貼大鼠麵部測量,測定3次取平均值。抓力:每2周測定1次,抓持大鼠尾根處,置於抓力測定儀,測定3次取平均值。痛閾:每2周測定1次,大鼠輻射熱甩尾法測痛閾,測定3次取平均值。第8周眼眶取血,37 ℃溫浴30 min,3 500 r·min-1離心10 min,吸取上清液製備血清,采用酶聯免疫雙抗夾心法測免疫係統指標(血清IgA,IgG,IgM,IL-2,IL-6水平);用肝素鈉抗凝,37 ℃溫浴30 min,3 500 r·min-1離心10 min,吸取上清液製備血漿,采用酶聯免疫雙抗夾心法測環核苷酸係統指標(血漿cAMP,cGMP水平),按試劑盒的方法和步驟測定。
2.3 統計分析
數據用SPSS 17.0軟件統計並分析,計量資料數據結果均采用±s表示,組間差異做兩樣本均數比較的t檢驗,以P-1組雌鼠自第4周起體重開始明顯增長(P-1組雌鼠自第2周起體重開始明顯增長(P-1劑量組雄鼠自第4周起體重開始明顯增長(P-1劑量組給藥4周時雌鼠抓力開始顯著升高(P-1劑量組給藥6周雄鼠抓力開始顯著升高(P-1劑量組給藥6周時麵溫開始下降(P-1劑量組給藥6周痛閾開始升高(P-1劑量組大鼠血清IgA的含量升高(P-1劑量組大鼠血清IL-6的含量明顯升高(P-1組血清IL-2的含量升高(P-1劑量組cAMP/cGMP明顯降低
4 討論
陰精作為人體生命活動的物質基礎,一切生命活動都是以陰精的損耗為代價的。《本草經解》曰“七傷者,食傷、憂傷、飲傷、房室傷、饑傷、勞傷、經絡營衛氣傷之七傷也,七傷皆傷真陰”。《素問·舉痛論》曰“勞則耗氣之說,勞則氣耗,勞則喘息汗出,外內皆越,故氣耗矣”。可見短暫的劇烈運動可導致一時性的氣耗,長期過度勞作造成的則是真陰受損精絕[3]。本實驗通過長期超負荷遊泳訓練,在“形勞傷陰”的理論基礎上建立在病因上接近臨床、無人為直接幹預機體生理過程的陰虛內熱證模型。
黃精是常用的滋陰補氣藥。現代藥理研究發現,黃精除具有增加免疫功能、抗衰老、抗腫瘤、提高和改善記憶、降血糖、降血脂等作用外,還有抗菌作用,尤其是對結核杆菌和真菌有顯著的效果,同時又有降低血壓的作用;近期研究表明黃精對增加冠狀動脈血流量,減輕動脈粥樣硬化程度,提高肝髒中超氧化物歧化酶(SOD)活性有明顯的作用。本實驗進一步研究黃精的滋陰作用。
陰虛精血或津液虧損的病理現象,多見於勞損久病或熱病之後而致陰液內耗的患者。主症為五心煩熱、顴紅或午後潮熱、形體消瘦、性情急躁、心煩易怒、失眠多夢、頭暈眼花、腰膝酸軟、小便次多量少、心跳偏快、夜間盜汗、手足心發熱、耳鳴等[4]。