--抗血清濾紙幹燥保存
一、摘要
本實驗用濾紙切成1０mm×7mm小條，一端滴上０．０5毫升的抗血清，使自然向上擴散，在室溫中陰幹，保存在裝有幹燥劑的瓶中，經不同時間測定效價變化證明，在3０天內，用於病蠶診斷並無影響；若能保存在5℃溫度中，對效價影響更小。施行血清診斷時，先將濾紙片的吸血清部分剪成細條，加０．85％氯化鈉溶液1．6~3．2毫升，浸泡半小時以上，即可作對流免疫電泳或雙向擴散的抗血清使用。應用濾紙吸附抗血清幹燥保存方法，在一定時間內完全適合家蠶病毒病診斷要求，既便於運送，又定量正確，使用方便，是實用的家蠶病毒病抗血清臨時保存方法。
二、緒言
應用血清反應診斷家蠶病毒病，在國內外已有不少研究〔1，2，3〕。為了使血清診斷方法，更好的實用化，改進血清的保存和運輸是一個很重要的問題。本實驗參考有關資料，采用抗血清濾紙吸著幹燥保存法〔4〕研究了質型多角體病毒抗血清（CPVAb）、濃核症病毒抗血清（DNVAb）濾紙吸附幹燥保存的條件和抗體效價消退的關係，探討有實用意義的血清保存的方法，現將結果報告於下。
三、材料及方法
1. 血清吸附濾紙的製備及使用
吸附血清用的濾紙是新華大張濾紙，將其切成1０mm×7０mm大小的條狀，供吸附血清用。在濾紙一端，滴０．０5毫升的CPV圖1吸血用的濾紙片
抗血清或DNV抗血清，讓其自然向上擴散，置於25℃溫度中通風陰幹2~4小時。幹燥的血清濾紙用紙包好，放入裝有幹燥劑的有色廣口瓶中保存備用，使用時，將吸附抗血清的一端（帶淡黃色）用剪刀剪成十餘小片，加０．85％氯化鈉溶液，在室溫中浸泡3０~6０分鍾（或在低溫5℃中2小時），濾紙片上的抗體溶於０．85％的氯化鈉溶液中（圖1）。
2. 抗血清
胃腸型膿病病毒（CPV）及濃核症病毒（DNV）的純化，分別用分子篩柱層析〔5〕和中性鹽析法〔6〕。經純化的病毒分別給健康雄性家兔進行免疫靜脈注射，每次注射間隔一周，在第三次注射後一周，進行少量采血行預測效價，若抗體效價低，不合理想，可再追加注射一次，兩周後采全血，分離出抗血清，抗血清經56℃3０分鍾滅活處理，保存於低溫冰箱中備用。
抗血清的抗體效價測定，用對流免疫電泳法〔7〕，CPV抗血清效價2０48，DNV抗血清效價為512。
3. 濾紙吸著幹燥血清溶出時間探討
分別取抗CPV血清和抗DNV血清幹燥濾紙片一條，把吸著血清的一端（帶淡黃色痕跡部分）剪成細條，加０．85％氯化鈉液1．6毫升（32倍）浸漬，浸泡時間分25℃3０分鍾、1小時、2小時、4小時和5℃1小時、2小時及4小時、12小時，溶出的抗血清與冷凍保存的抗血清均倍比稀釋成數級，分別與相應抗原行對流免疫電泳，比較各血清效價變化情況。
4. 濾紙吸附幹燥血清的保存條件
吸著CPV及DNV抗血清的幹燥濾紙，分裝在墊有幹燥劑（矽膠）的棕色廣口瓶內，置於冰箱（5℃）和室溫（平均溫度25．8℃）中保存，經０、6、12、18……6０天保存後，用對流免疫電泳法分別測定在不同條件下經不同時間保存後抗血清效價的變化。