正文 項目五 燈盞細辛注射液的製備、質量分析(2 / 2)

異常毒性:取本品,依法檢查(《中國藥典》2005版二部附錄Ⅺ C),應符合規定。

溶血與凝聚:①2%紅細胞混懸液的製備:取兔血數毫升,放入盛有玻璃珠的錐形瓶中,振搖10min,除去纖維蛋白原,使成脫纖血,再用生理氯化鈉溶液洗滌3~5次,每次5~10mL,搖勻,離心,棄去上清液,沉澱的紅細胞再用生理氯化鈉溶液洗至上清液不呈紅色為止。將所得的紅細胞用生理氯化鈉溶液配成2%的混懸液,即得。

②檢驗方法:取試管7支,按上表依次加入2%紅細胞混懸液和生理氯化鈉溶液,混勻後,於37℃恒溫水浴中,分別加入不同量的藥液,搖勻,置37℃恒溫的水浴中,開始每隔30min觀察一次,1h後,每隔1h觀察一次,共觀察3次。

按上述檢查,以第3試管為準,本品在3h內不得出現溶血和紅細胞凝聚。

其他:應符合注射劑項下有關的各項規定(《中國藥典》2005版附錄ⅠU)。

【含量測定】(1)野黃芩苷照高效液相色譜法(《中國藥典》2005版附錄Ⅵ D)測定。

色譜條件與係統適用性試驗:以十八烷基矽烷鍵合矽膠片為填充劑,以甲醇-四氫呋喃-0.1%磷酸溶液(14∶14∶72)為流動相,檢測波長為335nm,柱溫40℃。理論板數按野黃芩苷峰計算應不低於2500。

對照品溶液的製備:取野黃芩苷對照品適量,精密稱定,加90%甲醇製成每1mL中含0.1mg野黃芩苷的溶液,即得。

供試品溶液的製備:精密量取本品2mL,置10mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,過濾,取續濾液,即得。

測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL,注入液相色譜儀,測定,即得。

本品每1mL含黃酮以野黃芩苷(C21H18O12)計,應為0.40~0.60mg。

(2)總咖啡酸酯

對照品溶液的製備:取1,5-氧-二咖啡酰奎寧酸對照品適量,精密稱定,加0.1mol/L磷酸氫鈉溶液製成每1mL含10μg 1,5-氧-二咖啡酰奎寧酸的溶液,即得。

供試品溶液的製備:精密量取本品1mL,置200mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即得。

測定法:分別取對照品溶液與供試品溶液,照紫外-可見分光光度法(《中國藥典》2005版附錄Ⅴ A),在305nm波長處測定吸光度,計算,即得。

本品每1mL含總咖啡酸酯以1,5-氧-二咖啡酰奎寧酸(C25H24O12)計,應為2.0~3.0mg。

3.燈盞細辛注射液抗心肌缺血作用

取經心電圖篩選合格的健康Wister大鼠50隻,隨機分為5組,即生理鹽水組(NS),燈盞細辛注射液(DenZhanXinXi)0.5g/kg劑量組,燈盞細辛注射液(DenZhanXinXi)1g/kg劑量組,燈盞細辛注射液(DenZhanXinXi)1.5g/kg劑量組,陰性對照組,每組10隻。實驗組大鼠均連續灌胃給藥7d,末次給藥1h後烏拉坦1.0g/kg ip進行麻醉,仰位固定於鼠台上將針狀電極插入四肢皮下,記錄正常Ⅱ導聯心電圖。舌下注射垂體後葉素0.6U/kg,5s內注完。記錄注射垂體後葉素後15s、30s、2min、5min、10minⅡ導聯心電圖,觀察S-T段的變化情況。統計方法實驗數據以x—±s表示,組間t檢驗進行統計分析。

五、考核標準

優秀:操作熟練、規範;能夠完成燈盞細辛注射液的製備和質量分析;了解抗心肌缺血實驗方法以及燈盞細辛注射液的藥理作用。

合格:操作基本熟練、規範;基本能夠完成燈盞細辛注射液的製備和質量分析;基本了解抗心肌缺血實驗方法以及燈盞細辛注射液的藥理作用。

不合格:操作不熟練、不規範;不能夠完成燈盞細辛注射液的製備和質量分析;不了解抗心肌缺血實驗方法以及燈盞細辛注射液的藥理作用。