第11章 常用實驗動物的特性、應用及飼養管理(三)(1 / 3)

二、在生物醫學中的應用

1.致熱原等實驗研究兔的體溫變化靈敏,對細菌內毒素、化學藥品、異種蛋白最易產生發熱反應,發熱反應典型、恒定,廣泛用於製藥工業及人、畜用生物製品等各類製劑的熱原質檢及發熱解熱機製研究。給兔注射細菌培養物和內毒素可引起感染性發熱反應。給家兔皮下注射死的大腸杆菌或乙型副傷寒杆菌,幾小時內即可引起發熱,並可持續12h;給家兔靜脈注射傷寒-副傷寒四聯菌苗0.5~2.0ml/kg(菌苗含量不低於100億/ml)注射後1~2h,直腸溫度上升1~1.5℃並可持續3~4h。

給兔注射某些化學藥品或異性蛋白等也可引起發熱反應。皮下注射2%二硝基溶液(300mg)15~20min後開始發熱,1~1.5h 達高峰,升高2~3℃;皮下注射鬆節油(0.4mg)後18~20h 引起發熱,24~36h 達高峰,升高1.5~2℃;肌內注射10%蛋白酶1.0g/kg,可在2~3h 內引起發熱,體溫升高顯著;皮下注射消毒脫脂牛奶3~5ml,通常3h後體溫升高1~1.5℃。

2.微生物和免疫學研究兔對許多病毒和致病菌敏感,可以建立天花、腦炎、狂犬病、血吸蟲、弓形蟲等病的動物模型,用於研究人體相應的疾病。

兔血清產量多,可製備高效價和特異性強的免疫血清。腮淋巴結明顯,適合注射,被廣泛地用於人、畜各類抗血清和診斷血清的研製。病原體免疫血清,如細菌、病毒、立克次體等免疫血清。間接免疫血清,如兔抗人球蛋白免疫血清、兔抗羊球蛋白免疫血清。抗補體抗體血清,如兔抗豚鼠球蛋白免疫血清。抗組織免疫血清,如兔抗大鼠肝組織免疫血清、兔抗大鼠肝鐵蛋白免疫血清。製備畜用兔化組織疫苗,如豬瘟兔化疫苗。

3.心血管病和肺心病的研究兔頸部神經血管和胸腔構造特殊,很適合做心血管實驗,如直接法記錄頸動脈血壓、中心靜脈壓;間接法測量冠狀動脈流量、心搏量、肺動脈和主動脈血流量,還可采用兔耳灌流和離體兔心等方法來研究藥物對心血管的作用。此外,還可以用兔複製心血管病和肺心病及糖尿病的動物模型,如結紮家兔冠狀動脈前降支可複製實驗性心肌梗死模型;以重力牽拉阻斷冠狀動脈法複製家兔缺血性瀕危心肌模型;通過選擇阻斷冠狀動脈左室支位置的遠近及牽拉重力的大小,可調整心肌梗死的範圍及程度,也可複製心源性休克或缺血性心律紊亂模型;靜脈注射烏頭堿100~150mg、鹽酸腎上腺素50~100ng/kg,可誘發家兔心律失常;靜脈注射1%三氯化鐵水溶液,每次0.5~4ml,每周2~6次,總劑量為25ml,注射完後45天可形成肺心病;小劑量三氯化鐵(11ml)加0.1氯化鉻生理鹽水溶液霧化吸入,連續10次,霧化停止後10天可形成肺水腫。

兔對外源性膽固醇吸收率高達75%~90%,而大鼠僅為40%;對高脂血症清除能力較低,靜脈注射膽固醇乳液後,引起的脂血症可持續72h,而大鼠僅為12h;造型時間短,一般3個月左右即可成型,而犬需14個月,雞、猴有時可達一年以上。家兔形成的高脂血症、主動脈粥樣硬化斑塊、冠狀動脈粥樣硬化等病變與人類的病變極其相似。

4.生殖生理和避孕藥研究兔屬刺激性排卵動物,交配後10~12h排卵,雄兔的交配動作或注射絨毛膜促性腺激素80~100U均可誘發排卵,可準確檢測排卵時間並容易取得胚胎材料,也可用於避孕藥研究。性周期一般為8~15天,雌兔可表現為活躍、不安、跑跳踏足、抑製、少食及外陰稍有腫脹、潮紅、有分泌物,持續3~4天,此時交配,極易受孕。但無效交配後,由於排卵後黃體形成,可出現假孕現象,產生乳腺,子宮增大等表現,經16~17天而終止。

5.眼科研究兔的眼球大,便於進行手術操作和觀察,是眼科研究中最常用的動物。如在雙眼角膜上複製等大、等深的創傷瘢痕模型,以左右對比觀察藥物療效和治療原理,可排除異體間的個體差異,還可在眼前房內移植卵巢皮質,觀察藥物對排卵的影響。

6.皮膚反應實驗兔對刺激反應敏感,反應近似於人,常選用家兔皮膚進行毒物對皮膚局部作用的研究、兔耳可進行實驗性芥子氣皮膚損傷和凍傷以及燙傷的研究;化妝品對皮膚影響的研究;各種人用和畜用生物製品中的毒素、類毒素等皮膚反應試驗。

7.遺傳性疾病和生理代謝失常的研究如進行軟骨發育不全、低澱粉酶血症、維生素A缺乏、動脈硬化等研究,同時也廣泛應用於研究藥物的致畸作用或其他幹擾正常生殖過程的現象。

8.其他方麵進行各種寄生蟲病的研究、畸形學的研究,進行各種人用和畜用生物製品中的毒素、類毒素和病毒等皮膚反應試驗,以及製品的效價試驗、安全試驗,進行化學工業上的急性和慢性毒性試驗等。在實驗生理學方麵的應用,在中等教育與高等教育教學生理學課程中多采用家兔作為實習動物。可用做生物製品的原材料,如用以生產豬瘟兔化弱毒疫苗。

三、飼養管理

兔的飼養管理,是兔繁殖、育種、營養、飼料等知識的綜合利用。飼養管理對家兔的繁殖生產及其仔兔的生長發育極為重要。一個養兔單位即使有品質優良的種兔、優越的環境條件及良好的飼料配方,如果飼養管理失誤,不僅會使良種退化,而且也必然會引起各種疾病的發生和流行,造成嚴重損失。供實驗的家兔,因飼養管理不當而導致實驗失敗的例子不勝枚舉,為保證家兔繁育和實驗工作的安全運行,應進行科學的飼養管理。

為達到兔的標準化飼養,應采用全價顆粒飼料。繁殖兔、育成兔和各種實驗兔的飼料配方應符合規定的標準並保持相對穩定。對哺乳的母兔、孕兔以及剛離乳後的育成兔應保證足夠的營養需要,對種雄兔、後備種兔和實驗待用兔應適當限製能量標準,防止脂肪沉積造成過肥,各種兔均應經常供給足夠的清潔飲水。

實驗兔的生產目的與各種經濟兔的生產不同。前者對外界環境條件的敏感性強、適應性差,並且要求背景資料齊全。所以在繁育生產和試驗研究過程中,不僅要按著兔群的遺傳學和微生物學控製的等級要求提供相應的環境條件,還必須實行科學的程序化管理。

(一)兔的繁育

1.配種兔性成熟的早晚,取決於品種、性別、營養以及各種環境因素的影響。一般來說,兔的初配月齡,大型品種為7~8個月,中型品種為6~7個月,小型品種為5~6個月。雌兔在1個月裏可發情2~3次,發情周期為8~15天,發情持續期為3~5天,個別的可能長達5天以上,在此期間配種較為順利。雌兔發情後,舉動不安,食欲下降,開始時,外陰黏膜呈潮紅色,到發情旺盛時,變成老紅色,發情後期則又變成紫紅色。當其外陰部呈老紅色時進行交配則受孕率最高。兔的交配方法有如下幾種。

(1)自然交配法就是把雄、雌兔混養在一起自由交配。這種方法簡單及時,並能防止漏配和節省人力,但缺點較多。雄兔整天追逐雌兔交配,體力消耗過大,精液品質低劣,受孕率與產仔率低,且易衰老,所生仔兔體質差,抗病力低。容易傳染疫病,影響兔群安全。因此這種配種方式現在一般很少使用。

(2)人工輔助交配法雌雄分籠飼養管理條件下,在雌兔發情期間,人為地把發情雌兔放入雄兔籠內進行交配。方法是:在雌雄兔配種之前,首先檢查其健康狀況和發情表現,若雌兔發情良好,正值交配時機,可按配種計劃,把雌兔放入雄兔籠內配種。交配後,再經1~2min,即可把雌兔送回原籠,並將雌雄兔耳號及交配日期等詳細登記在配種卡上。為了提高雌兔的受孕率和產仔率,在雌兔配種之後隔10~12h再複配一次。每批配種應在3天內交配完畢,這樣可保證同批仔兔日齡不超過1周。頻密繁殖法,在產後3~4天內交配。半頻密繁殖在產後2~3周再次交配。每隻兔交配後立即登記。

(3)人工授精人工授精是兔繁殖改良最經濟、最科學的方法。它可提高優良種雄兔的配種效率,保證精液的質量,提高受孕率和產仔率,杜絕生殖器官疾病的傳播,便於開展科學研究。

具體方法是:用假陰道采取品質精良的雄兔的精液,經顯微鏡檢查,若精子活動好,密度大,可用7%的葡萄糖稀釋液做2~3倍稀釋,然後用一截15cm長的人用導尿管,經滅菌消毒和稀釋液衝洗後,吸取稀釋好的精液,將導尿管插入發情雌兔的陰道內4~5cm處,慢慢將精液注入陰道底部子宮頸口附近即可。為了保證雌兔的受胎效果,在人工授精之前4~6h內可在耳靜脈注射促性腺激素,刺激雌兔排卵。在人工授精的操作過程中,要注意嚴格消毒,無菌操作。

2.妊娠診斷兔的妊娠期平均為30天,個別也有28天或35天者。在雌兔交配後10~12天采用摸胎法進行診斷,方法是在配種或輸精後10天左右,抱住雌兔,一手伸入雌兔腹下,手心朝上,手指合攏,在雌兔的小腹處探摸胎仔。懷孕8~10天時的胎仔猶如蠶豆大小的扁圓肉球,具有彈性和光滑感。注意要與結腸內糞球相區分,糞球呈硬而缺乏彈性的圓粒狀手感。懷孕兔在記錄表上填入預產期,空懷的再編入下一批進行交配。

3.分娩按預產期提前2~3天(即交配後27~28天)準備好產箱放入籠內,放入產箱後每天檢查一次,分娩過程大致可分為2個階段,即分娩前的準備階段、胎仔和胎衣排出階段。第一階段主要變化為子宮肌層開始收縮,子宮頸擴大。此時雌兔表現為陣痛,精神不安,四爪刨地、頓足、弓背,並排出胎水。第二階段即胎仔和胎衣排出階段,子宮頸已完全張開,因此使胎仔容易通過,這時子宮收縮的強度和次數都大大增加,最後將胎仔擠出子宮外,此時雌兔邊產出,邊將仔兔臍帶咬斷,並將胎衣吃掉,同時,舐幹仔兔身上的血跡和黏液,然後跳出巢窩找水喝。這時要滿足雌兔的飲水,否則雌兔常常會吃掉仔兔。雌兔分娩產仔的時間較短,一般產完一窩仔兔隻需20~30min。但也有個別雌兔,產下一批仔兔後,間隔數小時或數十小時,才產第二批仔兔。產後應立即記錄產仔日期、產仔數。如有特殊需要再記錄初生體重,並按產仔多少在同批產仔雌兔間調劑代乳,寄養的仔兔需做好標誌並記錄。

4.哺乳雌兔自分娩到仔兔離乳,這段時間稱為哺乳期,需40~45天。哺乳期雌兔每天分泌的乳汁,可達100ml左右,在泌乳高峰期甚至有達200ml者。雌兔不但產奶量高,且乳質濃度也高。兔乳含蛋白10.4%,脂肪12.2%,乳糖1.8%,灰分2.0%,幹物質26.4%,是牛奶和山羊奶的2倍多。因此,哺乳期必須注意加強哺乳雌兔和仔兔的飼養管理。

5.測重一般仔兔在21日齡開始采食飼料,育種學常把21日齡的仔兔窩重作為衡量母兔泌乳性強弱的指標。

6.離乳離乳時間取決於交配方法,以及兔的型號。一般采用半頻密繁殖較多,仔兔在6周齡或45日齡離乳;頻密繁殖時,仔兔是在28日齡離乳。小型仔兔40~50日齡離乳,體重達500~600g;大型仔兔40~45日齡離乳,體重達1.0~1.2kg。恰當的離乳時間,應是雌兔的泌乳量已顯著下降,而仔兔已能很好地采食固體飼料的時候,但也有人認為,仔兔28~30天離乳是有利的,可以提高雌兔的繁殖率,且有利於仔兔生長。據認為離乳後仔兔有機會充分攝取食物。離乳時每隻仔兔均按統一編碼打上耳號和產期、同窩仔數、體重、21日齡窩重以及父、母號等項一並記入仔兔登記表內。離體方法有2種:一種是一次性斷乳,即全窩仔兔與雌兔一次分開;另一種方法是分批斷奶,即在斷奶時將發育良好的仔兔首先與雌兔隔離,留下發育差的仔兔再哺乳一段時間後再第2次,第3次斷奶。但不論哪一種斷奶方法,都應遵守將雌兔取走,將斷奶仔兔留在原籠飼養的原則,這樣可以顯著地減少仔兔因斷奶而發生的應激反應。

(二)兔的飼養設施

1.飼養環境兔的飼養環境是指飼養兔所具備的一切物質條件,就是指影響兔生長發育和生理生化平衡的一切外界條件及因素。

(1)溫度溫度是兔飼養中最敏感的條件之一。外界環境過高或過低的溫度,均對兔的飼養產生不良影響。一般來講,兔舍溫度應維持在16~26℃之間。當外界溫度達30℃以上時,兔即表現體溫升高,食欲下降,生長發育停滯;懷孕雌兔體重下降;新生仔兔生活力低,體重不足,死亡率可達90%~100%;雌兔可出現瀕死前的流涎或神經症狀。與高溫相比較,兔雖能抵抗較低溫度的變化,但對實驗兔來講,過低的溫度環境同時會不同程度地影響其正常的生長發育及各項生理指標。因此,在建造試驗兔舍時,要充分注意兔舍的保溫與隔熱問題,既要具備冬天保暖,又要能夠夏天防暑降溫。

(2)通風換氣兔舍通風換氣的目的,主要是引進舍外新鮮空氣,排除舍內汙濁氣體,有利於降低舍內各類微生物的孳生,減少有害氣體及傳染病發生的來源。兔舍內的通風換氣可通過門窗自然通風、機械通風等各種方法進行。兔舍的通風換氣要均勻,不留死角,防止形成“賊風”進入兔舍。兔舍的換氣量控製在每隻3.2m2/h較為理想。

(3)濕度潮濕的環境是影響兔生長發育的一個重要因素。兔長期處在潮濕的環境中,機體的抵抗力降低,發病率增加,病情加劇。潮濕的環境,易促使病原微生物的孽生,使兔易患疥癬、濕疹等皮膚病。此外,潮濕的環境中,很容易使飼料變黴,使兔群暴發真菌病,引起中毒。兔舍內的適宜濕度為50%~65%。